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谢俊鹏
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北京朝阳区遗传发育所
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诺维赞,你们的重组酶c112能否使用去磷酸化的线性化质粒?不能的话,单酶切如何使用infusion连接?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,可以使用去磷酸化的线性化质粒。希望对您能有所帮助~
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胡图图
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你好,请问R123-01,Q311-02/03,这两款产品,再写文章时应该怎么写名字
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管理员:
南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,主要与您文章中的其他产品统一形式即可。可以为:产品名(Vazyme),如Q311可以表述为:ChamQ SYBR qPCR Master Mix(Vazyme)。具体产品名可在官网输入货号查找。希望对您能有所帮助~
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曾梓敖
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ultra一步克隆。请问如果上下游同源臂15-20bp的CG值一直都比较高(60-70),然而又没办法更改位点,那影响大吗?或者在使用时克隆时间等等因素调整之类的?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,同源序列的GC含量超过60%的话,克隆效率下降甚至连不上,最好可以换个克隆位点。如果不能换,就只能尝试优化重组反应的条件,如将反应温度提高至50度,反应时间延长至5min或15min。希望对您有所帮助~
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王恒
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单点突变试剂盒中想问一下PCR扩增阶段中的延伸时间需要多长?说明书上写30-60sec/kb,如果我的质粒长度是10000,那么意思是延伸时间为300-600sec?感觉时间好长啊,是不是不对?请指教
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管理员:
南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,您的理解是正确的。延伸时间与聚合酶的延伸速度和片段长度有关,说明书上的延伸速度30-60s/kb,指的是扩增1kb需要30s-60s,扩增10kb的片段时,延伸时间设置为5min或10min就可以。希望对您有所帮助~
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董春艳
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您好,购买的试剂盒ChamQ Universal SYBR qPCR Master Mix使用的DNA模板量推荐是多少,谢谢
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管理员:
南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好。根据所测定基因的表达量,模板起始量是需要做相应摸索的。建议先用原始模板进行qPCR,以未稀释模板得到的Ct值为参考,进行梯度稀释,Ct值落在15-25时对应的模板浓度就是所需的模板浓度。希望对您能有所帮助~
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胡佳敏
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您好,我购买了产品Q311-02,R123-01,想用QPCR来检测炎症因子。请问我应该用全血还是血清?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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老师您好,为了更好地了解您的实验情况并为您解答问题,建议您拨打4006009335电话进一步咨询。感谢您的支持~
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何炅
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请问XL10菌株和XL1-Blue的区别是什么呢?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,XL1-Blue和XL10的基因型不一样。
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曹臻
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多片段克隆的同源重组试剂盒可以用作但片段克隆吗?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,多片段克隆试剂盒适用于2-5个插入片段的克隆,如果您要做单片段克隆推荐使用C112或C115。
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王菁
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2016***@mail.sdu.edu.cn
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建库试剂盒TruePrep® DNA Library Prep Kit V2 for Illumina®进行09-2/PCR富集的时候为什么TD502/TD503不加PPM,PPM的作用是什么呢?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,因为TD502和TD503的起始量分别为5ng和1ng,使用接头中的N5、N7是完全够用来扩增的,而TD501的起始量为50ng,接头中的N5、N7无法满足扩增需求,所以需要额外加一管PPM引物。PPM引物是P5和P7序列的混合引物。
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柳絮
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liux***@163.com
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同源重组克隆时,我设计的引物同源臂序列的GC含量超过了60%,会有很大的影响吗?我需要克隆到一个特定的位点,所以同源序列只能是唯一的
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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克隆效率和同源臂GC含量、载体和片段投入量以及感受态细胞效价都有关系,同源臂GC含量超过60%会使克隆效率降低。如果不能换克隆位点的话,建议:尽量提高线性化载体和插入片段的浓度,使用效价高的感受态细胞来进行尝试;如果您使用的是C112,可以把重组反应条件改为50度5分钟,如果您使用的是C115,做单片段克隆的话可以把重组反应时间延伸至30min。
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孙瑞斌
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sunr***@caas.cn
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CUT&Tag适技术用于植物吗?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,植物需要制备成原生质体。
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罗仁礼
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辽宁省沈阳市东北大学生命科学院
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克隆一直连不上,用了phanta高保真扩增,准备连接T载体,请问怎么用普通taq酶给平末端产物加A尾巴呢? 可以直接在PCR再延伸的步骤时加入taq酶吗?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,高保真酶扩增完的产物不带A尾,可尝试使用Vazyme无缝克隆产品C112/C113/C115;若后面做TA克隆可用普通的Taq酶进行加A反应。 具体加A方法:在10μl体系中,加入纯化后的PCR产物1-7μl,同时加入1μl 10×Taq Buffer(含MgCl2)、0.5μl 10mM dNTPs、0.2μl Taq DNA聚合酶(不加引物),最后用超纯水补足体系,72℃反应10-15min即可。
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邬俊
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jun***@harbourbiomed.com
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TruePrep Index Kit V2 for Illumina 是否可以和其它公司的DNA建库试剂盒兼容使用(譬如KAPA的HyperPrep,NEB的NEBNext Ultra等)?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,我们并未使用过其他公司的试剂盒进行测试。根据实验需求,推荐选用Vazyme转座酶DNA建库试剂盒TD501-TD503进行后续实验。
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冯贺雄
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clonexpress一步法定向克隆无缝克隆试剂盒可以把插入片段分成两段连接吗,我的整段扩增不出来,中间引物要如何设计
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,可以将插入片段分成两段连接,老师可以使用我们的C113或C115,做多片段克隆(2个插入片段),引物设计可以使用我们的CE Design软件进行设计(官网上搜索C113或C115,在说明书旁边有软件下载链接)。
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李肥
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lani***@126.com
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加了RNAkeeper以后的人组织还可以做ELISA吗?
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南京诺唯赞生物科技有限公司先生
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您好,不建议再继续进行ELISA。
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