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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

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  • MR101-说明书.pdf

    大小:
    2020-06-29 19:15:03
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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

miRNA1stStrandcDNASynthesisKit(bystem-loop)  microRNA逆转录产品(茎环法) ·优秀的线性关系 在宽广的模板区间内具有良好的线性关系,可检出低至pg级RNA模板·优越的反应体系  最适的Buffer组分及浓度,更适用于microRNA的逆转录 ·简便的引物设计 提供配套的引物设计软件,使得引物设计更加简便 优秀的线性关系 以小鼠肝脏组织TotalR
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MR101-01/02
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-
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FAQ
组分
说明书

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

microRNA 逆转录产品(茎环法)

优秀的线性关系:在宽广的模板区间内具有良好的线性关系,可检出低至pg 级RNA 模板

优越的反应体系:最适的Buffer 组分及浓度,更适用于microRNA 的逆转录

简便的引物设计:提供配套的引物设计软件,使得引物设计更加简便

以小鼠肝脏组织Total RNA 的10 倍稀释梯度(10 pg-1 μg) 为模板,使用miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) (Vazyme #MR101) 进行逆转录,得到的cDNA 使用miRNA Universal SYBR ® qPCR Master Mix (Vazyme #MQ101)扩增mmu-miR-16 基因。结果显示,在宽广的模板区间内,该配套产品具有优秀的线性关系。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) 是适用于茎环法miRNA cDNA 一链合成的专用试剂盒,含基因组DNA 去除步骤,可以在42℃2 min 条件下快速去除基因组DNA 的污染,保证后续结果更加可靠。试剂盒基于的HiScript ® II Reverse Transcriptase 具有极高的热稳定性,配以针对优化的缓冲体系,均有利于miRNA 特异性逆转录产物的生成。cDNA 产物后续定量,推荐使用本公司的miRNA Universal SYBR ® qPCR Master Mix (Vazyme # MQ101),以获得最优的实验结果。同时,配套推出miRNA逆转录茎环引物和定量引物的设计软件,操作简单,为miRNA 实验保驾护航。

组分

MR101-01

(50 rxn / 20 μl reaction)

MR101-02

(100 rxn / 20 μl reaction)

RNase free dd2O

1 ml

1 ml

5 × gDNA Wiper Mix

100 μl

200 μl

10 × RT Mixa

100 μl

200 μl

HiScript II Enzyme Mix b

100 μl

200 μl

a. 包含dNTP。

b. 包含RNase inhibitor。

-20℃保存。

关键词:
MR101-01/02
microRNA逆转录产品(茎环法)
MR101
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Q1:MR101能否用于加polyA尾法逆转录?

A1:不能。MR101是通过茎环法逆转miRNA,利用茎环引物在逆转录酶的作用下获得cDNA。而加polyA尾法体系中含有两个酶的作用,首先是polyA聚合酶在单链RNA的3’端加上一串polyA尾,然后利用体系中的Oligo dT通用型引物在逆转录酶的作用下进行逆转录反应。我们产品中没有polyA聚合酶,故不能用于polyA尾法逆转录。

Q2:miRNA茎环引物如何设计?怎么配套使用MR101和MQ101?

A2:在诺唯赞公司官网-资源中心-实验工具有一个Vazyme miRNA引物设计软件,下载后打开,只需要把目的miRNA序列输入到第一个框中,第二个框中所示为我们公司茎环序列,已经默认填在框里了,然后点击“设计引物”,最大的框中出现的“逆转录引物序列”就是所需要合成的茎环引物序列,“PCR引物序列”就是后续做PCR或是荧光定量的上下游引物,其中下游引物是根据茎环序列设计的,所以能够通用,MQ101试剂盒中的mQ Primer R就是通用的下游引物,所以如果采用MR101进行miRNA的逆转,配套使用MQ101就无需合成定量的下游引物,可以直接采用试剂盒中的mQ Primer R。

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