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MiPure Cell/Tissue miRNA Kit ( 离心柱型) 细胞/组织miRNA提取试剂盒
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MiPure Cell/Tissue miRNA Kit ( 离心柱型) 细胞/组织miRNA提取试剂盒

货  号:
RC201
价  格:
¥
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MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit( 离心柱型)

细胞/组织miRNA提取试剂盒

miRNA 提取效率高,起始量范围广

大分子RNA及基因组DNA残留更少

操作简便,兼容性强

 

1

使用MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit与Total RNA提取试剂(如Trizol)分别从等量样本(细胞或小鼠肝脏组织)中提取miRNA、Total RNA,琼脂糖凝胶电泳检测等量产物,结果如图所示:对于细胞或小鼠组织,MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit提取得到的产物中不含有大分子RNA,如18S、28S RNA。

图2

通过qPCR实验检测等量产物中miR-16基因,结果显示,MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit对于小片段RNA(包含miRNA)的提取产量优于Trizol法。

MiPure® Cell/Tissue miRNA Kit是基于硅胶柱吸附法开发的miRNA提取分离试剂盒,能有效提取长度20 nt-200 nt的小片段RNA,包括miRNA、siRNA 等。高效的裂解液能轻松裂解各种动物组织和细胞,减少蛋白和杂质对产物的干扰,优化的硅胶吸附填料高效去除基因组DNA和大分子RNA,保证产物的高产量和高质量。试剂盒适合于从<5 x 106真核培养细胞,<100 mg 动物组织提取小分子RNA,得到的小分子RNA可直接用于芯片分析,Northern杂交,RT-PCR等。试剂盒也可用于提取总RNA,>200 nt 的大分子RNA,满足客户的不同需求。

组分

RC201 (50 rxn)

Box 1

RNA Isolater

60 ml

Box 2

Buffer miRW1

30 ml

Buffer miRW2

20 ml

RNase-free ddH2O

30 ml

MiPure® RNAspin Column

50 

MiPure® miRNA Column

50 个

2 ml Collection Tube

100 个

Box 1:4℃避光保存

Box 2:室温保存

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:离心后分层现象不明显。

A1:(1) 未添加氯仿或氯仿不纯。确保加入氯仿,氯仿不含有异戊醇或其它添加成分。

(2) 样品中含有机溶剂。若样品含有有机溶剂如DMSO、乙醇、强碱等试剂会影响分层。

(3) 加入氯仿后混匀效果不好。加入氯仿后,一定要剧烈振荡混匀15 sec。颠倒或短时间涡旋会导致分离不明显或引入DNA污染。如果离心后分层不明显,重复振荡和静置,再次离心。

Q2:RNA产量低。

A2:(1) 样品匀浆不充分。处理培养细胞时,反复吹打裂解液进行裂解;处理动物组织时,推荐使用机械匀浆器匀浆。

(2) 样品起始用量太少或者太多。根据说明书给出的参考用量及实际情况来决定样品用量。

(3) RNA的洗脱效率低。RNase-free ddH2O没有加到膜上,或洗脱体积不够。可加入预热的30-50 μl RNase-free ddH2O到膜上,室温静置2 min,然后离心洗脱RNA。

Q3:RNA降解。

A3:(1) 组织/细胞用量太多。减少样品用量,正确的样品用量是获得理想结果的必要条件。

(2) RNase污染。操作过程避免RNase的污染。戴一次性干净手套;在单独洁净的区域操作;戴口罩并在操作过程中避免讲话。通过以上办法可有效防止实验者汗液、唾液中的RNase污染。使用RNase-free的实验器具,包括枪头和离心管。RNA实验所用器具应专门使用,不可用于其它实验。RNA实验所用试剂都应专用,避免混用后造成交叉污染。RNase-free ddH2O建议分装后保存。

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