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Taq Plus DNA Polymerase

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P201-说明书.pdf

大小：

2020-06-29 18:56:58

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Taq Plus DNA Polymerase

TaqPlusDNAPolymerase 比普通Taq酶具有更高的扩增效率和保真度的DNA聚合酶加入3’→5’外切酶活性保真度是TaqDNAPolymerase的6倍提高扩增产量和长度提供即用型的预混液：最大程度地减少实验步骤图一使用TaqPlusDNAPolymerase分别扩增6kb和10kb的人基因组DNA片段以及15kb的λDNA片段。 M:DL15,000DNAMarker T

价格：

200.0

市场价

元

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货号：

P201-01/02/03

所属分类

高产量PCR

数量：

库存:

89991

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产品详情

FAQ

组分

说明书

Taq Plus DNA Polymerase

比普通Taq 酶具有更高的扩增效率和保真度的DNA 聚合酶

加入3’→5’外切酶活性

保真度是Taq DNA Polymerase的6倍

提高扩增产量和长度

使用Taq Plus DNA Polymerase 分别扩增6 kb 和10 kb 的人基因组DNA 片段以及15 kb 的λDNA 片段。

M: DL15,000 DNA Marker

Taq Plus DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3’→5’外切酶活性(校对活性)的蛋白组成的混合酶，保真度是Taq DNA Polymerase的6倍。对于长度在5 kb以内的目的片段，与Taq DNA Polymerase相比，Taq Plus DNA Polymerase具有更强的扩增性能。一般情况下，使用Taq Plus DNA Polymerase可以得到更高的产量。有些Taq DNA Polymerase不能扩增的片段，Taq Plus DNA Polymerase可以正常扩增。PCR产物的3’端带A，可克隆至T载体，并适用于ClonExpress^® 快速克隆试剂盒（C112/C113/C115/C601）。

组分	P201-01 250 U	P201-02 1,000 U	P201-03 3,000 U
10 × Taq Plus Buffer (Mg²⁺ plus)	1ml	4ml	3×P201-02
Taq Plus DNA Polymerase (5 U/μl)	50 μl	200 μl	3×P201-02

-20°C

关键词:

P201-01/02/03

比普通Taq酶具有更高的扩增效率和保真度的DNA聚合酶

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板的GC含量过低会导致扩增效率较差，可适当延长引物长度或通过梯度PCR摸索合适的反应条件；模板中存在抑制物，特别是甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，会造成DNA脱嘌呤而影响PCR结果，建议稀释使用或重新制备；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶因保存或运输不当而失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符。如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活；温度过低则模板变性不彻底。可对退火温度设置梯度，摸索最佳的退火温度。检测延伸时间是否充足。

(6) Mg²⁺浓度不合适

Mg²⁺浓度过低可影响PCR产量甚至使PCR扩增失败；Mg²⁺浓度过高会降低PCR的特异性，应适当调整Mg²⁺浓度。

Q2：扩增特异性差，非特异性扩增。

A2：(1) 引物

引物设计不够优化。引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体，可降低引物浓度进行优化，必要时重新设计引物。

(2) 模板