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Taq DNA Polymerase (Mg2+ free Buffer)

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P102-说明书V10.1.pdf

大小：

2020-07-01 00:13:33

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Taq DNA Polymerase (Mg2+ free Buffer)

TaqDNAPolymerase(Mg2+freeBuffer) 高纯度耐热DNA聚合酶优化的缓冲体系，便于快速得到理想的扩增结果；提供即用型的预混液，最大程度地减少实验步骤本产品由克隆有ThermusaquaticusDNAPolymerase基因的大肠杆菌表达并经过多步纯化精制得到，不含核酸内切酶、核酸外切酶以及细菌DNA。TaqDNAPolymerase具有5’→3’聚合酶活性和5

价格：

180.0

市场价

元

180.0

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货号：

P102-01/02/03

所属分类

普通PCR

数量：

库存:

29997

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产品详情

FAQ

组分

说明书

Taq DNA Polymerase (Mg²⁺ free Buffer)

高纯度耐热DNA聚合酶

优化的缓冲体系，便于快速得到理想的扩增结果

本产品由克隆有Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌表达并经过多步纯化精制得到，不含核酸内切酶、核酸外切酶以及细菌DNA。Taq DNA Polymerase 具有5’ → 3’ 聚合酶活性和5’ → 3’ 外切酶活性，但无3’ → 5’ 外切酶活性。PCR 产物的3’ 端带A，可克隆至T 载体，并适用于ClonExpress^® 快速克隆试剂盒(C112/C113/ C115/C601)。

组分	P102-01 1,000 U	P102-02 5,000 U	P102-03 10,000 U
10×Taq Buffer (Mg²⁺ free)	4 ml	P102-01× 5	P102-01× 10
25 mM MgCl₂	4 ml
Taq DNA Polymerase (5 U/μl)	200 µl

-20℃保存。

关键词:

P102-0

高纯度耐热DNA聚合酶

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板的GC含量过低会导致扩增效率较差，可适当延长引物长度或通过梯度PCR摸索合适的反应条件；模板中存在抑制物，特别是甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，会造成DNA脱嘌呤而影响PCR结果，建议稀释使用或重新制备；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶因保存或运输不当而失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符。如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活；温度过低则模板变性不彻底。可对退火温度设置梯度，摸索最佳的退火温度。检测延伸时间是否充足。

(6) Mg²⁺浓度不合适

Mg²⁺浓度过低可影响PCR产量甚至使PCR扩增失败；Mg²⁺浓度过高会降低PCR的特异性，应适当调整Mg²⁺浓度。

Q2：扩增的条带亮度不太亮。

A2：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解。

(2) 模板