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2 × Taq Master Mix for PAGE

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P113-说明书-V21.1.pdf

大小：

2021-04-09 16:57:53

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2 × Taq Master Mix for PAGE

2×TaqMasterMixforPAGE 产物适合于聚丙烯酰胺凝胶电泳的DNA聚合酶优化的缓冲体系，便于快速得到理想的扩增结果提供即用型的预混液，最大程度地减少实验步骤本产品由克隆有ThermusaquaticusDNAPolymerase基因的大肠杆菌表达并经过多步纯化精制得到，不含核酸内切酶、核酸外切酶以及细菌DNA。TaqDNAPolymerase具有5’→3’外切酶活性，但无

价格：

210.0

市场价

元

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货号：

P113-01/02/03

所属分类

普通PCR

数量：

库存:

89990

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产品详情

FAQ

组分

说明书

2 × Taq Master Mix for PAGE

产物适合于聚丙烯酰胺凝胶电泳的DNA聚合酶

优化的缓冲体系，便于快速得到理想的扩增结果

即用型的预混液，最大程度地减少实验步骤

本产品由克隆有 Thermus aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌表达并经过多步纯化精制得到，不含核酸内切酶、核酸外切酶以及细菌DNA。Taq DNA Polymerase 具有5’ → 3’ 聚合酶活性和5’ → 3’ 外切酶活性，但无3’ → 5’ 外切酶活性。PCR 产物的3’ 端带A，可克隆至T载体，并适用于ClonExpress^® 快速克隆试剂盒(C112/C113/C115/C601)。本产品附带的10 × Taq Buffer 经过特殊优化，PCR产物适合于聚丙烯酰胺凝胶电泳及琼脂糖凝胶电泳。

组分	P113-01	P113-02	P113-03
2 × Taq Master Mix for PAGE	5 × 1 ml	15 × 1 ml	50 × 1 ml

-20℃保存。

关键词:

P113

产物适合于聚丙烯酰胺凝胶电泳的DNA聚合酶

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板的GC含量过低会导致扩增效率较差，可适当延长引物长度或通过梯度PCR摸索合适的反应条件；模板中存在抑制物，特别是甲醛固定及石蜡包埋的组织常含甲酸，会造成DNA脱嘌呤而影响PCR结果，建议稀释使用或重新制备；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶因保存或运输不当而失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符。如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活；温度过低则模板变性不彻底。可对退火温度设置梯度，摸索最佳的退火温度。检测延伸时间是否充足。

(6) Mg²⁺浓度不合适

Mg²⁺浓度过低可影响PCR产量甚至使PCR扩增失败；Mg²⁺浓度过高会降低PCR的特异性，应适当调整Mg²⁺浓度。

Q2：扩增的条带亮度不太亮。

A2：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解。

(2) 模板