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VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina

货  号:
NR801-01/02
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¥
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VAHTS® Small RNA Library Prep Kit for Illumina

small RNA-seq文库构建试剂盒

样本兼容范围广:

种类广:动、植物细胞/组织总RNA,分离纯化的small RNA,以及其他类型的总RNA(如外泌体总RNA),均可作为起始模板;

起始量广:兼容100 ng-1 μg总RNA的投入量。

文库丰度高:

接头污染少,最终有效文库比例高,miRNA比例高、涵盖种类多。

多种纯化方式可选:

试剂盒包含文库构建所需的所有组分,提供磁珠分选和PAGE胶分离两种文库纯化方式,可根据初始文库质量任意选择。

精心优化的反应体系:

单管操作,文库产量高,平行重复相关性好。

图A:以1 μg小鼠肝脏总RNA为起始模板的small RNA文库;

图B:以1 μg小鼠肝脏总RNA为起始模板的small RNA文库经PAGE分离后的最终文库;

图C:以80 ng HeLa细胞培养物上清外泌体总RNA为起始模板的samll RNA文库。

VAHTS® Small RNA Library Prep Kit for Illumina是针对Illumina高通量测序平台定向开发的small RNA文库构建专用试剂盒。本试剂盒适用于模板起始量为0.1-1 μg的动、植物总RNA,以及分离纯化的small RNA。small RNA的3’和5’端分别连上通用接头,再经过逆转录、PCR扩增以及PAGE胶或磁珠纯化等步骤,最终得到适用于Illumina平台的测序文库。试剂盒包含文库构建及纯化所需的所有酶和缓冲液,所有组分都经过了严格的质量控制和功能验证,最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

组分 NR801-01 (24 rxn) NR801-02 (96 rxn)
RL3 Adaptor 24 μl 96 μl
RL3 Buffer 240 μl 960 μl
RL3 Enzyme mix 72 μl 288 μ
RT Primer 24 μl 96 μl
RL5 Adaptor 24 μl 96 μl
RL5 Buffer 24 μl 96 μl
RL5 Enzyme mix 60 μl 240 μl
RT Buffer 192 μl 768 μl
RT Enzyme mix 48 μl 192 μl
Amplification mix 3 1.2 ml 4 × 1.2 ml
pBR322/MspI digest DNA Marker 120 μl 480 μl
6 × Loading Buffer 500 μl 2 × 1 ml
Co-precipitator 120 μl 480 μl
RNase-free H2 O 500 μl 2 × 1 ml
GE Buffer 6 ml 24 ml
Filtration Column 24 个 96 个

RL5 Adaptor,-70°C储存;Filtration Column,室温储存;其余组分,-20°C储存。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:small RNA建库上机策略?

A1:单端测序,采用双端测序会导致数据量偏低

Q2:small RNA建库,能否不采用切胶方法,而采用磁珠分选的方法?

A2:磁珠分选的方法不能得到单一的目的条带,建议使用切胶方式

Q3:除Ttrizol裂解法提取总RNA外,能否使用离心柱法提取的总RNA作为起始模板?

A3:本试剂盒对总RNA的提取方式无特殊要求,如使用离心柱法提取试剂盒提取总RNA,请确保所使用的提取试剂盒不会损失small RNA。

Q4:RT primer能否在cDNA合成步骤添加?

A4: 不能。3’接头连接完成后加入的RT primer与多余3’接头反向互补形成双链结构,可以有效阻止5’接头与3’接头连接,从而减少接头二聚体的形成;另外,RT primer与已连上3’接头的RNA底物方向互补可作为逆转录步骤的引物,因此RT primer必须在3’接头连接完成之后添加,不能在cDNA合成步骤才添加。

Q5:除常规的动植物总RNA外,其他类型的总RNA是否可以作为起始模板进行文库构建?

A5:除动、植物总RNA以及分离纯化的small RNA外,本试剂盒可以兼容其他类型的总RNA,比如外泌体总RNA作为起始模板。

暂未实现,敬请期待
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货  号
N411-01/02/03