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T4 DNA polymerase

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N101-01
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T4 DNA Polymerase

用于末端平滑化

缺口填充 (无链置换活性)

切除3′突出末端或补平5′ 突出端,形成平末端

在模板及引物存在的条件下,T4 DNA聚合酶催化沿5´→3´方向合成DNA。此酶还具有3´→5´核酸外切酶的活性,该活性比DNA聚合酶I强。与DNA聚合酶I不同,T4 DNA聚合酶不具有5´→3´核酸外切酶活性。 

贮存缓冲液

10 mM Tris-HCl pH 7.4, 100 mM KCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton X-100, 50% glycerol

反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)

100 mM Tris-HCl pH 7.9, 500 mM NaCl,  100 mM MgCl2, 10 mM DTT

来源

克隆有来自T4噬菌体DNA  Polymerase基因的重组E. coli菌株。

单位定义

37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定义为1个活性单位 (U)。

组分

N101-01 2,000 U

T4 DNA polymerase (3 U/μl)

667 μl

10 × Blue Buffer

2 ml

反应缓冲液

10X Blue Buffer

100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25°C

500 mM NaCl

100 mM MgCl2

10 mM DTT

-20℃保存。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:N101与DNA聚合酶I有什么不同?

A1:该酶具有5´→3´ DNA 聚合酶活性和3´→5´核酸外切酶活性,且活性高于DNA聚合酶I。与DNA聚合酶I不同,T4 DNA聚合酶不具有5´→3´核酸外切酶活性,主要用于切除片段化DNA的3’端突出结构。 

 

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