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T4 Polynucleotide Kinase-V5.1.pdf
大小：2020-06-30 00:20:51
T4 Polynucleotide Kinase
T4 Polynucleotide Kinase
用于5’磷酸化
DNA或RNA 5′末端磷酸化，以便进行连接反应
DNA或RNA的末端标记，用作探针和进行DNA测序
T4 Polynucleotide Kinase能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4 Polynucleotide Kinase还具有3´-磷酸酶活性，将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 μM ATP, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × T4 PNK Buffer)
700 mM Tris-HCl pH 7.6, 100 mM MgCl2, 50 mM DTT
来源
克隆有来自T4噬菌体Polynucleotide Kinase基因的重组E. coli菌株。
单位定义
37℃、30分钟内使1 nmol的[γ-32P] ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
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组分 |
N102-01 10,000 U |
|
T4 Polynucleotide Kinase(10 U/μl) |
1 ml |
|
10 × T4 PNK Buffer |
2 ml |
反应缓冲液
10 × T4 PNK Buffer
700 mM Tris-HCl pH 7.6 @ 25°C
100 mM MgCl2
50 mM DTT
-20℃保存。
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