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T4 Polynucleotide Kinase

T4PolynucleotideKinase 用于5’磷酸化DNA或RNA5′末端磷酸化,以便进行连接反应 DNA或RNA的末端标记,用作探针和进行DNA测序 T4PolynucleotideKinase能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4PolynucleotideKinase还具有3´-磷酸酶活性,将3´-磷酸基团
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组分
说明书

T4 Polynucleotide Kinase

用于5’磷酸化

DNA或RNA 5′末端磷酸化,以便进行连接反应

DNA或RNA的末端标记,用作探针和进行DNA测序

T4 Polynucleotide Kinase能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4 Polynucleotide Kinase还具有3´-磷酸酶活性,将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。

贮存缓冲液

50 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 μM ATP, 50% glycerol

反应缓冲液 (10 × T4 PNK Buffer)

700 mM Tris-HCl pH 7.6, 100 mM MgCl2, 50 mM DTT

来源

克隆有来自T4噬菌体Polynucleotide Kinase基因的重组E. coli菌株。

单位定义

37℃、30分钟内使1 nmol的[γ-32P] ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。

组分

N102-01 10,000 U

T4 Polynucleotide Kinase(10 U/μl)

1 ml

10 × T4 PNK Buffer

2 ml

反应缓冲液

10 × T4 PNK Buffer

700 mM Tris-HCl pH 7.6 @ 25°C

100 mM MgCl2

50 mM DTT

-20℃保存。

 

关键词:
T4 Polynucleotide Kinase
用于5’磷酸化
N102
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Q1:N102能否应用于DNA文库构建末端修复环节?

A1:N102能够对DNA或RNA 5′末端磷酸化,以便进行连接反应。此外还需搭配其他DNA聚合酶进行DNA文库构建的末端修复。

 

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