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DNA polymerase I Klenow fragment-V21.1.pdf
大小：2021-11-12 17:02:43
DNA polymerase I Klenow fragment
DNA Polymerase I Klenow Fragment
用于末端平滑化
用随机引物制备探针
切除3′ 突出端或补平5′ 突出端，形成平末端
DNA 聚合酶I，大片段 (Klenow 片段)是E.coli DNA聚合酶 I 的蛋白酶水解产物，具有5´→3´ DNA 聚合酶活性和3´→5´核酸外切酶活性，但缺失了5´→3´核酸外切酶活性。Klenow片段既保留了全酶的高保真性，又不会降解 DNA 5´末端。
贮存缓冲液
25 mM Tris-HCl pH 7.4, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × Blue Buffer)
100 mM Tris-HCl pH 7.9, 500 mM NaCl, 100 mM MgCl2, 10 mM DTT
来源
克隆有来自E.coli DNA Polymerase I Klenow Fragment基因的重组E. coli菌株。
单位定义
37℃、30分钟内使10 nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。
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组分 |
N104-01 5,000 U |
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Klenow Fragment (5 U/μl) |
1 ml |
|
10 × Blue Buffer |
2 ml |
反应缓冲液
10 × Blue Buffer
100 mM Tris-HCl pH 7.9 @ 25°C
500 mM NaCl
100 mM MgCl2
10 mM DTT
－20°C保存。
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