
TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit
TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit
绿色荧光检测凋亡
经过优化FITC-12-dUTP 与未标记dNTP 的比例,提高了荧光检测的信噪比和灵敏度
高活性的重组TdT 酶保证荧光掺入效率
适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片
图1. 果蝇三龄幼虫视盘(eye disc)
凋亡诱导基因Hid 在特异性启动子驱动下在果蝇视盘的远端诱导出大量凋亡细胞。A. TUNEL 染色,标记凋亡细胞。B. ELAV 染色,标记所有的感光细胞。C. Merge
图2. 人睾丸组织切片经DNase I 处理
A. TUNEL染色,标记凋亡细胞。B. PI染色,标记所有细胞核。C. Merge。
细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA 被内源核酸内切酶有规律的降解成长度约为180 bp-200 bp 的整倍数的片段。本试剂盒采用TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 法,应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT) 在凋亡细胞断裂的DNA的3’- 羟基(3’-OH) 末端催化掺入荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP 标记的DNA 可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量。试剂盒对标记反应进行了优化,采用最佳比例的FITC-12-dUTP 和未标记dNTP 进行3’-OH 末端的核苷酸掺入,使得同一个断裂的DNA 片段末端可以形成更长的“标记尾巴”。该“标记尾巴”减少了相邻掺入dNTP 上标记基团的空间位阻,增加每个断裂片段上的荧光基团数目,降低荧光基团相邻后可能造成的聚集和淬灭,从而提高检测灵敏度,减少非特异性反应。
经过优化FITC-12-dUTP 与未标记dNTP 的比例,提高了荧光检测的信噪比和灵敏度,高活性的重组TdT 酶保证荧光掺入效率,适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片。
组 分 |
A111-01 (20 rxn) |
A111-02 (50 rxn) |
A111-03 (100 rxn) |
5 × Equilibration Buffer |
1.25 ml |
1.25 ml × 2 |
1.25 ml × 3 |
FITC-12-dUTP Labeling Mix |
100 μl |
250 μl |
250 μl × 2 |
Recombinant TdT Enzyme |
20 μl |
50 μl |
50 μl × 2 |
Proteinase K (2 mg/ml) |
40 μl |
100 μl |
100 μl × 2 |
DNase I (2 U/μl) |
5 μl |
13 μl |
25 μl |
10 × DNase I Buffer |
100 μl |
260 μl |
500 μl |
-20℃保存;FITC-12-dUTP Labeling Mix避光储存于-20℃。

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