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南京诺唯赞生物科技有限公司

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DNA Standard 1-6

货  号:
NQ105
价  格:
¥
2200.00
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DNA Standard 1-6

标准品试剂盒

包含绝对定量所有必须组分

新型染料法qPCR预混液VAHTSTM SYBR® qPCR Master Mix

扩增效率高、 GC含量兼容性好

标准品定量精准,批次间CV值<5%

精心优化的ROX染料浓度,提供ROX预混版本

兼容所有主流定量PCR仪

 

 

 

图1. 使用VAHTSTM Library Quantification Kit for Illumina®绘制的标准曲线。

 

 

  本品是使用染料qPCR法进行Illumina®平台高通量测序文库浓度测定的专用试剂盒。其工作原理为使用标准品绘制标准曲线,再根据标准曲线计算待测文库绝对浓度。试剂盒采用了一种基于抗体法热启动的新型染料法qPCR预混液VAHTSTM  SYBR® qPCR Master Mix。该预混液具有特异性高、扩增效率高、 GC含量适应性广、检测灵敏度高等诸多优势,非常适合进行文库浓度的绝对定量。 试剂盒中提供的所有试剂都经过了严格的质量控制,最大程度上保证了不同批次间实验结果的可重复性。

包装说明:

1. NQ101、NQ102、NQ103、NQ104为扩增组分试剂盒,包含VAHTS SYBR qPCR Master Mix、qPCR Primer Mix以及单独包装ROX (仅NQ101),包装量足够进行500次定量反应(20 μl reaction);NQ105为标准品试剂盒,包含DNA Standard 1-6,包装量可用于8次标准曲线绘制(3孔重复);NQ106为文库稀释液试剂盒,包含50 ml Library Dilution Buffer。

2. 根据反应时ROX Reference Dye是否需要添加及需要添加的种类分类,主流定量PCR仪可分为以下三类:

NQ101试剂盒中提供单独包装的ROX Reference Dye 1/2,适用于所有定量PCR仪。使用时根据上表选择适合的ROX Reference Dye;

NQ102试剂盒中无单独包装或预混ROX Reference Dye,适用于上表Type I 机型定量PCR仪;

NQ103试剂盒中的扩增预混液已预混Low ROX (ROX Reference Dye 2),适用于上表Type III 机型定量PCR仪;

NQ104试剂盒中的扩增预混液已预混High ROX (ROX Reference Dye 1),适用于上表Type II 机型定量PCR仪。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:DNA Standard 1 CT异常。

A1:(1)不恰当的基线设置会增大CT (DNA Standard 1)。手动调整基线为1-3循环。 

(2)仪器相关问题。确认所用ROX Reference Dye与定量仪器匹配。

Q2:文库各稀释度ΔCT与稀释倍数差异不一致

A2:(1)移液精确度差。 所有试剂在使用前应充分解冻并彻底混匀。 

(2)文库难于扩增。GC/AT含量过高或长度超过1 kb的文库扩增效率较差,定量波动性大。 (3)文库降解。文库应现用现稀释,稀释好的文库应置于冰上备用,用完丢弃。

Q3:DNA Standards有扩增,而文库没有或CT很大

A3:(1)文库接头序列错误:建议核对文库末端序列与试剂盒提供的引物序列是否匹配。 

(2)稀释度过高:建议减少稀释倍数,重复实验。 

(3)文库降解:文库应现用现稀释,稀释好的文库应置于冰上备用,用完丢弃。

暂未实现,敬请期待
暂未实现,敬请期待
货  号
N411-01/02/03