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HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

科学研究试剂

高通量测序文库构建试剂

药物研发试剂

  • R312-V10.1.pdf

    大小:
    2020-07-01 00:21:07
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HiScript III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

HiScript®III1stStrandcDNASynthesisKit(+gDNAwiper)第三代高效cDNA一链合成试剂盒(去基因组)基于更高效的HiScript®IIIReverseTranscriptase:逆转录效率高于二代产品灵活选择引物:针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物gDNAwiperMix可迅速彻底去除基因组污染:保证后续结果更加可靠,并可简化qPCR引物设计,
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产品详情
FAQ
组分
说明书

HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)

第三代高效cDNA 一链合成试剂盒(去基因组)

基于更高效的HiScript®III Reverse Transcriptase:逆转录效率高于二代产品

灵活选择引物: 针对不同实验设计可灵活使用不同类型的逆转录引物

gDNA wiper Mix可迅速彻底去除基因组污染:保证后续结果更加可靠,并可简化qPCR引物设计,无需跨内含子设计引物

1.后续实验为PCR

以1μg  HeLa细胞RNA为模板,按照R302说明书推荐体系进行逆转录,以1μl cDNA为模板,用2 ×Vazyme Lamp® Master Mix (Dye Plus)(Vazyme #P312)进行长片段扩增,将得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳,结果如图1所示:扩增条带单一且产量高

图1.长片段扩增电泳图

注:M:DL15000 Marker(Vazyme #MD103)

2.后续实验为qPCR

以100 ng HeLa 细胞 RNA为模板,使用 HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)(Vazyme #R312) 以及市售其他逆转录产品 (分别来自Supplier Ta、Th1、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti),按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应。将得到的 cDNA 进行多个基因的 qPCR定量分析。以不同公司产品为横坐标,△CT (△CT = Vazyme #R312 cDNA扩增CT值–各公司逆转录产品 cDNA 扩增CT值)为纵坐标绘图。从图中可以看出,除一些体系Th1△CT>0外,其余公司逆转录产品均△CT<0,说明 Vazyme #R312逆转录效率优于Ta、Th2、N、P、R、B、Tr、Ti 相关逆转录产品。

HiScript® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)是HiScript® II 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)的升级版本,包含新一代逆转录酶HiScript® III Reverse Transcriptase和针对逆转录优化的最适Buffer,进一步提高了一链合成的效率。该试剂盒中的5 × gDNAwiper Mix可在42℃,2 min条件下快速去除基因组DNA污染,保证后续结果更加可靠,并可简化qPCR引物设计,无需跨内含子设计引物。试剂盒中包含单组分逆转录引物Oligo (dT)20VN和Random hexamers,用户可根据需要,灵活选择逆转录引物进行后续实验。本试剂盒既可合成用于克隆等下游实验的全长cDNA (可达20 kb),亦可合成高度均一的用于qPCR定量的cDNA。

组分

R312-01 (50 rxn)

R312-02 (100 rxn)

RNase-free ddH2O

1 ml

1 ml

5 × gDNA wiper Mix

100 μl

200 μl

10 × RT Mixa

100 μl

200 μl

HiScript®III Enzyme Mixb

100 μl

200 μl

Oligo (dT) 20VN

50 μl

100 μl

Random hexamers

50 μl

100 μl

a. 包含dNTP

b. 包含RNase inhibitor

- 30℃~- 15℃保存。

关键词:
HiScript ® III 1st Strand cDNA Synthesis Kit (+gDNA wiper)
R312
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