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RoomTemp Sample Lysis Kit

货  号:
P073-01/02/03
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¥
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RoomTempTM Sample Lysis Kit

室温裂解试剂盒

操作简捷:室温3min即可,无需复杂模板提取

裂解效率高:裂解试剂与传统试剂盒提取基因组效果一致。

应用广泛:兼容Taqman® 探针法的SNP检测,qPCR探针法定量,PCR扩增等样本兼容广:可裂解新鲜血液、冻存血液、常规抗凝剂血液、组织匀浆、口腔拭子、FTA卡等多种样本

1. 应用衔接—PCR扩增

以常温裂解液(Vazyme #P073),血液基因组提取试剂盒(Vazyme #DC111),PK裂解试剂盒(Vazyme #PD101)及竞品T同时处理的3种抗凝剂全血样本为模板,使用PCR试剂(Vazyme# P222)分别扩增300bp/500bp/1kb/2kb的4个片段,进行琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示,常温裂解与试剂盒提取具有同等优异且单一的扩增条带,优于PK裂解和竞品。

图1. 4种方式处理全血样本的PCR扩增结果

2. 应用衔接—qPCR探针法定量

以常温裂解试剂盒(Vazyme #P073)与血液基因组提取试剂盒,PK裂解试剂盒及竞品T同时处理的6个抗凝剂全血样本为模板,使用qPCR试剂(Vazyme #Q811)对3个基因体系进行扩增检测。结果显示,△Ct(试剂盒/PK裂解/竞品 - 常温裂解)≥-0.5,常温裂解具有更优的灵敏度和扩增平台。

图2. 4种方式处理全血样本的∆Ct统计结果

 

图3. 4种方式处理全血样本的扩增曲线

3. 应用衔接— SNP分型

以常温裂解试剂盒(Vazyme #P073)与血液基因组提取试剂盒,PK裂解试剂盒及竞品T同时处理的18个抗凝剂全血样本为模板,使用qPCR试剂(Vazyme #Q811)对2个SNP位点(rs3787728、rs4947963)进行分型效果检测。结果显示,常温裂解与其他3种方式处理的样本均具有一致的良好分型效果。

图4. 4种方式处理全血样本的SNP分型结果

RoomTempTM Sample Lysis Kit是一个简单快速的血液室温裂解试剂盒。本试剂盒包含Lysis Buffer和Stabilizing Buffer两个组分,其中Lysis Buffer包含快速破坏细胞膜蛋白及膜结构的特殊组分,可以充分释放细胞内的基因组DNA,Stabilizing Buffer添加了保护蛋白和稳定因子,可以消除裂解样本中的抑制因子对下游qPCR和PCR反应的抑制作用,使裂解后的DNA溶液得以长期稳定储存。适用的血样类型包括新鲜血液、冻存血液及常规抗凝剂血液(EDTA、枸橼酸盐、肝素钠等)。室温裂解3 min,即可从全血样本中释放基因组DNA。裂解后的DNA溶液可直接作为模板,应用于Taqman® 探针法的SNP检测,qPCR探针法定量,PCR扩增等。无需繁杂的提取操作,即可达到与传统基因组提取方法一致的效果。除血液外,本试剂盒也可兼容裂解FTA血卡、口腔拭子、植物组织等多种样本。

 

组分

P073-01(250 rxn)

P073-02(1000 rxn)

P073-03(5000 rxn)

Lysis Buffer

5 ml

20 ml

100 ml

Stabilizing Buffer

5 ml

20 ml

100 ml

2 ~ 8℃保存。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1.qPCR扩增平台较低或者PCR产量低?

A1:可能是由于裂解的样本量较少,或者检测基因的表达量较低。可以尝试增加裂解的样本投入量及扩增体系中模板的投入量。以血液为例,Table 1中推荐的裂解液加入量可裂解2 - 10 μl样本,20 μl扩增体系可兼容1 - 10 μl模板,且对后续qPCR和PCR反应无影响。

Q2. 血液样本裂解后颜色呈现血红色?

一般情况下,血液裂解后的溶液为褐色,但个别血液样本裂解后呈现血红色,与血液样本有关,属于正常现象,对后续实验无影响。

Q3. 是否可以只使用Lysis Buffer进行裂解及后续扩增反应?

Stabilizing Buffer中添加了保护蛋白及稳定因子,可以消除裂解样本中的抑制因子对下游qPCR和PCR反应的抑制作用,使裂解后的DNA溶液得以长期稳定储存。如果只用Lysis Buffer进行样本裂解,下游扩增20 μl体系中推荐模板投入量为1 - 2 μl,裂解后的DNA溶液可于-20℃储存1周。其他情况下不推荐只加入Lysis Buffer裂解。

 

暂未实现,敬请期待
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货  号
Q811-02/03
货  号
P222-01/02/03/04
货  号
P515-01/02/03