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Bio-Lite Luciferase Assay System

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DD1201-01/02/03
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Bio-LiteTM  Luciferase Assay System 

操作简单 

可兼容高通量操作

经过ICH指南预验证

1.Immune Checkpoint Modulation Bioassay 

图1

将PD-1 Jurkat-NFAT-Luc (Effector Cell)与PD-L1 CHO-K1 (aAPC Cell)共孵育,分别用Bio-LiteTM和P公司的B产品检测PD-1 Ab的PD-1/PD-L1 Blockade活性,检测原理和结果分别由图1A、1B展示。

2.Fc Effector Activity Bioassay

图2

将FcγRIII Jurkat-NFAT-Luc (Effector Cell)与SK-BR-3 (Target Cell)共孵育,分别用Bio-LiteTM和P公司的B产品检测Trastuzumab的ADCC活性,检测原理和结果分别由图2A、2B展示。

3.重复性、线性、精密性和准确性

图3

根据ICH指南,以Trastuzumab ADCC Bioassay模型对Bio-LiteTM在生物活性检测中的重复性(图3A)、线性(图3B)、精密性和准确性(表3)进行验证。

Bio-LiteTM是一种高灵敏度、稳定、均质的萤火虫荧光素酶报告基因检测试剂盒。本试剂盒中含有高纯度的荧光素(Luciferin)和经过优化的反应试剂,使得反应更加稳定,对环境的耐受性更强,且异味更少。直接在细胞培养物中加入混合后的Bio-LiteTM检测试剂使细胞裂解,释放出荧光素酶,即可产生如图所示的反应,发出稳定的光信号。

组分

DD1201-01

DD1201-02

DD1201-03

Bio-Lite Luciferase Assay Buffer

10 ml

10×10 ml

100 ml

Bio-Lite Luciferase Assay Substrate(lyophilized)

1 vial

10 vials

1 vials

长期保存:-30 ~ -15℃,可在-20 ~ 0℃运输。

混合前:Bio-LiteTM Luciferase Assay Buffer可在室温保存90天(> 90%活性)或在2 ~ 8℃长期保存;

             Bio-LiteTM Luciferase Assay Substrate可在室温保存21天或在2 ~ 8℃保存90天(> 85%活性)。

混合后:Bio-LiteTM 检测试剂可在室温保存1天(> 80%活性)或在2 ~ 8℃保存5天(> 85%活性)。

            反复冻融10个循环仍可保持稳定,未使用完的试剂可于-20℃保存60天,若长期不用建议于-70℃保存。

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Q1:孔板的选择

A1:我们推荐使用平底非透发光检测板,黑色/白色皆可。此外,具有透明底部的非透细胞培养板,利于直接观察细胞的生长状况,也可用于发光检测,但此类孔板存在一定的孔间干扰。建议根据实验需要对不同类型的多孔板进行选择。

Q2:酶标仪的使用

A2:我们推荐使用具有发光(Luminescence)检测模块的酶标仪,建议每孔积分时间0.25~1秒,具体操作请参考该仪器的说明书。

Q3:使用该试剂时需要预先裂解好细胞吗?

A3:不需要,本品中已含有裂解成分,直接将本品加入待测细胞培养板中即可进行检测。

Q4:使用本品时需要避光吗?

A4:本品中含有荧光素底物,故需要保存在避光容器内;操作时在正常实验环境下操作,避免强光长时间照射即可。

 

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