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FastPure Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA Isolation Mini Kit
浏览量:

FastPure Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA Isolation Mini Kit

货  号:
DC112-01/02
价  格:
¥
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FastPure® Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA Isolation Mini Kit

快速纯化血液/细胞/组织/细菌基因组DNA试剂盒

质量高、完整性好:提取的DNA具有产量高,纯度好,片段完整等特点

样本适用范围广:适用于从多种新鲜或冻存的抗凝血、细胞、动物组织及细菌样本中直接提取DNA。

简便快捷:动物组织提供30min快速提取方案。

DNA完整性好

分别使用Vazyme #DC112(下图简称:V)与Q、Ti、O、C公司和本公司相关产品提取人293细胞、大鼠肝组织、大肠杆菌DH5α及金黄色葡萄球菌样本基因组DNA,并进行1%琼脂糖凝胶电泳。从下图中可以看出,Vazyme #DC112提取的DNA产量高,纯度高,完整性好。

M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。人293细胞约2.5×10^6,洗脱体积100 μl,上样量1 μl。

M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。大鼠肝组织约10mg,洗脱体积100 μl,上样量2 μl。

M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。DH5α,OD600=0.65,1.5 ml,洗脱体积100 μl,上样量2.2 μl。

M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。金黄色葡萄球菌,OD600=0.5,1 ml,洗脱体积100 μl,上样量2 μl。

DNA产量高、纯度好

分别使用Vazyme #DC112(下图简称:V)与Q、Ti、O、C公司和本公司相关产品提取人293细胞、大鼠肝组织、大肠杆菌DH5α及金黄色葡萄球菌样本基因组DNA,分别对DNA产物进行浓度和纯度检测,从图中可以看出Vazyme #DC112提取不同样本的基因组DNA与市售其他产品相比,产量更高。OD260/280及OD260/230数值更接近标准数值,纯度更好。

样本兼容性广

使用Vazyme #DC112(下图简称:V)按照说明书操作纯化以下样本基因组:(血液)200 μl人的EDTA、肝素钠、枸橼酸钠抗凝管血液样品、200 μl猪血、20 μl鸡血, (细菌)DH5α、金黄色葡萄球菌、271、275菌,(细胞)人293细胞、小鼠杂交瘤细胞、仓鼠Cho-K1,(组织)大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、小鼠脂肪、扇贝、鼠尾,100 μl洗脱, 1%琼脂糖凝胶电泳检测,上样量约为160-180 ng。M DL15000 Marker (MD103)。结果显示本试剂盒样本兼容性广泛,可对不同物种的基因组DNA进行高质量的提取纯化。

下游兼容性广

分别使用DC112提取大鼠心、肝、脾、肺、肾和脑组织中的基因组DNA进行下游PCR检测(普通PCR),并对产物进行琼脂糖凝胶电泳,从图中可以看出PCR产物条带清晰且单一,说明可以兼容下游PCR检测。

 

模板:2μl   Mix:P525  上样体积:10μl

分别使用Vazyme #DC112与Q、Ti、O、C公司相关产品提取人293细胞的基因组DNA后,以此为模板进行多重PCR检测,并对产物进行琼脂糖凝胶电泳,从图中可以看出同时进行多重PCR检测,产物条带清晰,说明可以兼容下游多重PCR检测。

模板:人293细胞100 ng  Mix:PM101  上样体积:5μl

本试剂盒主要适用于从多种新鲜或冻存的抗凝血、细胞、动物组织及细菌样本中提取基因组DNA。试剂盒采用硅胶膜纯化技术,提取过程中无需使用酚氯仿等有毒试剂,也无需进行耗时的醇类沉淀,并最大限度的去除RNA、杂蛋白、脂类及其他抑制性杂质。提取的基因组DNA纯度高,质量稳定,可用于酶切、PCR、Southern杂交等下游实验。

组分 DC112-01(50 rxn) DC112-02(200 rxn)
Buffer ACL 12 ml 48 ml
Proteinase K 1 ml 4 ml
Buffer BCL 12 ml 48 ml
Buffer WA 15 ml 60 ml
Buffer WB 20 ml 2 × 40 ml
Elution Buffer 20 ml 80 ml
FastPure gDNA Mini ColumnsⅡ 50 个 2 × 100 个
Collection Tubes 2 ml 50 个 2 × 100 个

Proteinase K于2 - 8℃保存,其他组分室温(15 - 25℃)保存。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

常见问题

原因

解决方案

 

吸附柱堵塞

1. 样本投入量太多

请按照兼容范围投入样本。

2. Proteinase K活性下降

更换新的Proteinase K,使用后的Proteinase K必须保存于2-8℃。

3.样本裂解不充分

延长56℃水浴时间,增加颠倒混匀次数。

 

 

 

 

DNA产量低

1.样本被反复冻融

避免反复冻融样本,推荐使用新鲜样本或只冻融过一次的样本。

2.动物组织裂解不充分

组织块尽量剪碎或液氮研磨,提取时使样本及时与Buffer ACL及Proteinase K充分混匀,且可适当延长56℃水浴裂解时间。

3.革兰氏阳性菌破壁不完全

可适量增加Lysozyme的用量或延长其消化时间;或者按照复杂菌操作流程进行操作。

4.Proteinase K活性下降

更换新的Proteinase K,使用后的Proteinase K必须保存于2-8℃。

5. 未完全将裂解混合物转移至吸附柱内

细胞裂解后加无水乙醇,溶液中会出现絮状沉淀,需要将其同溶液一起转移至吸附柱内。

6. 洗脱液问题

请使用试剂盒自带的Elution Buffer洗脱,若用ddH2O或其他洗脱液,确认洗脱液pH值在8.0 - 9.0之间。可提前将Elution Buffer预热至55℃后再进行洗脱,有利于提高DNA得率。

7. 洗脱效率低

洗脱液需滴加于膜中央位置;增加洗脱体积或洗脱次数。

8. Buffer WA/WB未添加无水乙醇

请按瓶身标签所示,加入指定体积的无水乙醇至Buffer WA和Buffer WB中。

 

 

DNA纯度低

 

1. 杂蛋白污染

未使用Buffer WA漂洗,或Buffer WA中未加入正确体积的无水乙醇。请按瓶身标签加入指定体积的无水乙醇后操作。

2. 杂质离子污染

未使用Buffer WB漂洗,或只漂洗一次。请按照说明书使用Buffer WB漂洗两次。

3. RNA残留

未在指定步骤加RNaseA,或RNaseA孵育时间过短。请按照说明书指定步骤加入RNaseA,对于RNA含量较多的样本,可适当延长孵育时间。

4.乙醇残留

吸附柱在洗脱前,未空管离心去除乙醇。请按照说明书空管离心后打开吸附柱管盖,室温放置2-5 min让乙醇彻底挥发。

 

暂未实现,敬请期待
暂未实现,敬请期待
货  号
P515-01/02/03
货  号
PM101-01/02/03