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Myco-Blue Mycoplasma Detector

货  号:
D101-01/02
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¥
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Myco-Blue®  Mycoplasma Detector

一台水浴锅,就可以快速完成支原体的日常检测

取1 μl培养上清直接检测,不需要样品预处理

产物不需要电泳,避免出现假阳性

颜色区分明显,无弱阳性/假阴性

准确性媲美qPCR法,优于PCR法

图1.随机挑选16个细胞培养物,用三种方法检测支原体,对结果进行比较。

Myco-Blue® Mycoplasma Detector 是专门针对细胞培养物的支原体污染快速检测试剂,其核心为Vazyme 独特的等温扩增技术。Myco-Blue® Mycoplasma Detector 使用非常简便, 只需吸取1 μl 细胞培养上清加入到反应体系中,在60℃孵育1 h。若细胞培养物被支原体污染,支原体DNA 的保守序列会被等温DNA聚合酶特异性扩增,使反应液由紫色变成天蓝色,肉眼观察, 即可判定结果。无需PCR 仪/qPCR 仪,无需电泳,在细胞房内就可以轻松完成。非常适合于生物制药企业、疫苗生产企业、单抗生产企业、细胞治疗/ 胚胎实验室以及科研实验室的日常支原体检测。

组   分

D101-01 20rxn

D101-01 50rxn

Myco-Blue® Buffer   

480 μl

1.2 ml

Myco-Blue® Enzyme

20 μl

50 μl

Positive Control

10 μl

25 μl

石蜡油

500 μl

1.25 ml

-20℃保存

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:如果出现支原体污染该如何补救?

A1:若发现细胞存在支原体污染,建议直接丢弃,防止污染其它细胞。同时,复苏一支同批次冻存的细胞进行检测。如果发现是支原体阳性,则将该批次细胞全部丢弃。如果细胞很珍贵,可尝试使用Myco-Off支原体清除试剂(Vazyme #D103),对细胞进行挽救。

Q2:如何处理支原体严重污染的细胞?

A2:对于支原体严重污染的细胞,如果7天不能清除干净,推荐延长处理时间。

Q3:支原体清除试剂盒,是否可以用于液氮罐清洗时去除支原体?

A3:理论上可以用于,但是用量较大,建议使用物理方法清除污染。

Q4:如何减轻支原体清除试剂对细胞的毒性。

A4:经验证在大多数情况下,本产品对细胞几乎无毒性,对于部分敏感细胞,若细胞出现生长缓慢,可以将试剂按1:2000进行稀释使用。

Q5:MycoBlueTM Mycoplasma Detector的灵敏度是多少?如何保证检测灵敏度?

A5:MycoBlueTM Mycoplasma Detector可从1 μl培养上清中准确检出至少500 cfu的支原体,即灵敏度为5 × 105 cfu/ml。通常情况下,培养上清中的支原体含量在106-108 cfu/ml之间,该试剂可以满足绝大多数实验的需要。据文献报道,单个支原体感染细胞后,在3-5天内可扩增至106 cfu/ml。因此,尽量在换液或传代3天后再进行检测,以使上清中的支原体含量增多,提高检出率。

Q6:加入培养基上清后,反应液即变色;或者反应结束后,反应液颜色呈现紫色与蓝色以外的颜色,是什么原因?如何解决?

A6:在极少数情况下,培养基成分会对MycoBlue试剂的颜色产生干扰,比如Cell Boost 5(Hyclone)会使MycoBlue试剂呈现出粉红色。

处理方法:

(1) 取少量培养基上清或细胞悬液,500g离心5min,收集上清;

(2) 高速离心(>12,000g) 5 min,使上清中可能存在的支原体沉淀。弃掉大部分上清,保留约50 μl;再加入950 μl无菌水。用移液器吹打混匀;

(3) 重复步骤(2)两次,弃掉大部分上清,保留约50 μl;

(4) 取1 μl进行检测。

Q7:操作过程中如何避免出现假阳性?

A7:只要稍加注意,不会出现假阳性。最重要的是反应结束后,不能打开管盖,否则反应产物会产生气溶胶,导致后续检测出现假阳性。另外,加样时注意更换枪头,并将阳性对照放在最后一管加入,也可以进一步降低假阳性出现的风险。

Q8:MycoBlueTM Mycoplasma Detector可以检测多少种支原体?

A8:MycoBlueTM Mycoplasma Detector可以准确检出28种支原体:

A. laidlawii*

M. salivarium*

M. neophronis

M. primatum

M. gallinarum

M. lipophilum

M. hominis*

M. pirum*

M. timone

M. leopharyngis

M. sphenisci

M. falconis

M. arginini*

M. orale*

M. caviae

M. maculosum

M. bovigenitalium

M. alkalescens

M. fermentans*

A. granularum

M. alvi

A. oculi

M. auris

 

M. hyorhinis*

A. pleciae

M. bovis

M. iners

M. columbinum

超过95%以上的细胞是被这8种支原体所污染

 

暂未实现,敬请期待
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货  号
D103-01/02/03