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Bacteria RNA Extraction Kit

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R403-01
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¥
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Bacteria RNA Extraction Kit

原核生物总RNA 提取试剂

针对原核生物(革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌)及真菌(非孢子)总RNA 提取而定向优化

前处理液与基于异硫氰酸胍酚的裂解液连用,大幅度提高RNA 产量和纯度

操作简便,省时,无需溶菌酶或超声处理

 

 

使用Bacteria RNA Plus Reagent配合RNA  Isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #401)提取大肠杆菌DH5α总RNA。M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD103)。A:1x108菌量,100 ul Bacteria RNA Plus Reagent预处理。B:5x107菌量,100 ul Bacteria RNA Plus Reagent预处理。C:5x107菌量,100 ul DEPC水预处理。D:5x107菌量,不做预处理。以上洗脱体积均为25 ul,上样量1 ul。

Bacteria RNA Extraction Kit 是针对从细菌(革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌)中分离总RNA 的简便,稳定的方法。试剂盒由Bacteria RNA Plus Reagent (Vazyme #R402)和RNA isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #R401)组成。Bacteria RNA Plus Reagent >(Vazyme #R402)含有优化的缓冲体系,螯合剂及蛋白变性剂等成分,能够高效抑制细菌内源RNase,同时使蛋白质变性。RNA isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #R401)总RNA 提取试剂基于异硫氰酸胍和酚,具有极强的裂解能力,可在短时间内裂解样本,即时保护RNA 的完整性。二者连用,可以从细菌中高效地提取总RNA,保证产量和质量的最大化。提取的总RNA 适用于Real-time PCR (qPCR), RT-PCR, Northern Blotting 等下游实验。本试剂也适用于酵母等真菌RNA 提取。

组分

R403-01  (100 rxn)

Bacteria RNA Plus Reagent

20 ml

RNA isolater Total RNA Extraction Reagent

100 ml

RNA Isolater Total RNA Extraction Reagent 4℃避光保存;

Bacteria RNA Plus Reagent室温存放,如果试剂在存放过程中产生沉淀析出,请于65℃加热片刻溶解并混匀。

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:RNA产量偏低。

A1:使用Bacteria RNA Extraction Kit提取原核生物RNA达不到预期产量,可能原因有:(1) 裂解不够完全或起始菌量低于要求起始量,可适当增加起始菌量,或延长处理时间到5 min;(2) RNA沉淀未完全溶解,可在60℃加热5 min充分溶解RNA。

Q2:RNA降解。

A2:使用Bacteria RNA Extraction Kit高温处理细菌数分钟不会引起RNA降解,加入RNA isolater Total RNA Extraction Reagent(Vazyme #R401)后可与游离出来的RNA充分接触,保护 RNA不受降解。分离出水相后的处理过程如果存在RNase则可能引起降解,因此请务必在实验整体过程中使用RNase-free的枪头及离心管,使用DEPC处理过的水配制试剂及溶解RNA,保证操作区域的清洁,减少RNA降解的可能。某些原核细菌如枯草杆菌内源性RNase含量较高,难以完全灭活,如果发现产物有部分降解,可适量降低起始菌量,使用200 μl处理液,严格按照标准操作流程进行实验,全程保持低温操作,并以熟练的操作手法尽量缩短不必要的操作时长。

暂未实现,敬请期待
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