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miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix
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miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix

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MQ101-01/02
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¥
330.00
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miRNA Universal SYBR® qPCR Master Mix

miRNA染料法定量专用预混液

超高的扩增特异性:基于化学法热启动的AceTaq® DNA Polymerase,95°C前完全封闭酶活,配以专利特异性促进因子Exactor,扩增更特异。

优越的反应体系:最适的Buffer 组分及浓度,更适用于microRNA的逆转录及qPCR 实验。

宽广的平台兼容:miRNA Universal SYBR® qPCR Master Mix中添加通用型ROX使得mix能够在兼容不同平台qPCR仪器,而无需进行ROX浓度调整。

图1. 超高的扩增特异性

microRNA 序列短,同一家族不同成员序列极其相似,有些仅有单个碱基差别,因此特异性对 microRNA 定量至关重要。miRNA Universal SYBR ® qPCR Master Mix 以化学法热启动 AceTaq ® DNA Polymerase 为核心酶,配以优化的Buffer,能够最大限度区分 microRNA 同一家族不同成员间单个碱基的差异,实现高特异性定量。

图2. 卓越的扩增灵敏度

以 HeLa 细 胞 Total RNA 为 模 板 逆 转 录, 扩 增 hsa-miR-15、hsa-miR-29、hsa-miR-155、hsa-miR-200 基 因; 以 小 鼠 肝 脏组织 Total RNA 样本进行逆转录,扩增 mmu-miR-16、mmu-miR-20、mmu-miR-21 基因。结果显示,与同类产品相比,miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) (Vazyme #MR101) 配 套 miRNA Universal SYBR ® qPCR Master Mix (Vazyme #MQ101) 的反应体系,均有优异的表现。

图3. 宽广的平台兼容性

使用miRNA Universal SYBR ® qPCR Master Mix(Vazyme #MQ101) 在不同qPCR 仪上扩增同一基因,在StepOnePlusTM、QuantStudio TM 3、CFX Connect 均具有优秀的定量结果,说明Vazyme #MQ101 仪器适用性广,无需针对不同仪器调整 ROX 浓度。

本产品是使用SYBR® Green I嵌合荧光法进行miRNA定量反应的专用预混液。由于miRNA序列短,且同一家族的miRNA序列往往高度相近,故在定量时对特异性要求极高。本品基于化学法热启动的AceTaq® DNA Polymerase,配以优化的Buffer,能够极大地减少非特异性扩增;同时,特殊的ROX Reference Dye,使得预混液适应于所有qPCR仪器,无需在不同的仪器上调整ROX浓度,只需在配制反应体系时加入引物和模板即可进行扩增。

组分

MQ101-01

125 rxn (20 μl reaction)

MQ101-02

500 rxn (20 μl reaction)

2 x miRNA Universal SYBR® qPCR Master Mixa

1.25 ml

4 x 1.25 ml

MQ Primer R(10um)b

70ul

250ul

a.包含dNTP,Mg2+,AceTaq DNA Polymerase,SYBR Green I,Specific ROX Reference Dye等。

b.序列为AGTGCAGGGTCCGAGGTATT

- 20℃避光保存

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:MR101能否用于加polyA尾法逆转录?

A1:不能。MR101是通过茎环法逆转miRNA,利用茎环引物在逆转录酶的作用下获得cDNA。而加polyA尾法体系中含有两个酶的作用,首先是polyA聚合酶在单链RNA的3’端加上一串polyA尾,然后利用体系中的Oligo dT通用型引物在逆转录酶的作用下进行逆转录反应。我们产品中没有polyA聚合酶,故不能用于polyA尾法逆转录。

Q2:miRNA茎环引物如何设计?怎么配套使用MR101和MQ101?

A2:在诺唯赞公司官网-资源中心-实验工具有一个Vazyme miRNA引物设计软件,下载后打开,只需要把目的miRNA序列输入到第一个框中,第二个框中所示为我们公司茎环序列,已经默认填在框里了,然后点击“设计引物”,最大的框中出现的“逆转录引物序列”就是所需要合成的茎环引物序列,“PCR引物序列”就是后续做PCR或是荧光定量的上下游引物,其中下游引物是根据茎环序列设计的,所以能够通用,MQ101试剂盒中的mQ Primer R就是通用的下游引物,所以如果采用MR101进行miRNA的逆转,配套使用MQ101就无需合成定量的下游引物,可以直接采用试剂盒中的mQ Primer R。

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