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  • 产品名称: HiScript II One Step RT-PCR Kit
  • 产品编号: P611-01
    • 产品规格: 50 rxn

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HiScript® II One Step RT-PCR Kit

高产量一步法RT-PCR

 

逆转录和PCR在同一管内进行

检测灵敏度可达0.1 pg总RNA

可扩增超过10 kb的长片段

 


图1. A. 以Hela细胞总RNA为模板,用HiScript® II One Step RT-PCR Kit (P611) 扩增555 bp GAPDH片段。检测灵敏度可达到0.1 pg。

B. 以猪蓝耳病毒PRRSV RNA为模板,用HiScript® II One Step RT-PCR Kit (P611) 扩增660 bp片段。检测灵敏度可达到0.2 TCLD50。

C. 以1 μg Hela细胞总RNA为模板,用HiScript® II One Step RT-PCR Kit (P611)扩增不同长度的片段。可成功扩增长达12.1 kb的UTRN片段。

 

       HiScript® II One Step RT-PCR Kit专为以RNA为模板 (如RNA病毒)的终点法PCR检测而设计。使用基因特异引物 (GSP),逆转录和PCR反应在一管内完成,不需要额外的开管/移液操作,大大提高了检测通量,并降低了污染的风险。整合HiScript® II Reverse Transcriptase以及Champagne TaqTM DNA Polymerase的优越性能,配合经过优化的缓冲体系,HiScript® II One Step RT-PCR Kit的检测灵敏度可达到0.1 pg总RNA,并可扩增长达10 kb的片段。试剂盒以便捷的Master Mix形式提供。

组分说明:

组分

P611-01 50 rxn (50 ul/rxn)

RNase free ddH2O

1 ml×2

2×One Step Mixa

625 μl×2

One Step Enzyme Mixb

125 μl

10 ×Loading buffer

1.25 ml

a. 包含dNTP和缓冲体系

b. 包含HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor以及Champagne TaqTM plus DNA Polymerase

 

贮藏条件: -20℃。

 

质量控制:

所有组分经检测均无核酸外切酶,核酸内切酶,RNase残留。

 

功能检测1:以1 μg HeLa 细胞总RNA为模板,扩增FIB基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见10 kb目的条带。

 

功能检测2:以1 pg HeLa 细胞总RNA为模板,扩增GAPDH基因。琼脂糖凝胶电泳,EB染色,可见有单一的550 bp条带。

 

注意事项:

1. 防止RNase污染,请保持实验区域洁净;操作时需要戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需保证RNase-free。

 

2. 超过3 kb的产物扩增前需要进行65℃ 2 min的退火处理以获得全长cDNA用于扩增。

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