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  • 产品名称: HiScript II One Step qRT-PCR SYBR Green Kit
  • 产品编号: Q221-01
    • 产品规格: 100 rxn

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HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit

染料法一步qRT-PCR,兼顾特异性和扩增效率

 

适合低成本、高通量的基因表达分析

特殊的添加剂成分,最大程度抑制引物二聚体的产生,定量结果更准确

兼顾高扩增效率,可检测低至1 pg的总RNA模板

 

图1. Q221具有更高灵敏度及更广的定量范围。

以Hela细胞总RNA为模板,用HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit (Q221) 和其他公司试剂盒同时扩增B2M (A)和GUSB(B)基因。HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit扩增效率更高,表现为同一模板量下较低的Ct值,且在低模板量下几乎没有引物二聚体产生。

 

      HiScript® II One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit采用SYBR®  Green I 嵌合荧光法,专为以RNA为模板(如RNA病毒)的定量PCR检测而设计。使用基因特异引物 (GSP),逆转录和PCR反应在一管内完成,不需要额外的开管/移液操作,大大提高了检测通量,并降低了污染的风险。整合HiScript® II Reverse Transcriptase以及Champagne TaqTM DNA Polymerase的优越性能,配合经过优化的缓冲体系,One Step qRT-PCR SYBR® Green Kit的检测灵敏度可达到1 pg 总RNA。Buffer中加入的增强因子可以有效减少引物二聚体的形成,提高特异性。试剂盒以便捷的Master Mix形式提供。

组分说明:

组分

Q221-01 250 rnx (20 μl/rxn)

RNase free ddH2O

1.25 ml×2

2×One Step SYBR® Green Mixa

1.25 ml×2

One Step SYBR® Green Enzyme Mixb

250μl

50×ROX Reference Dye 1c

100μl

50×ROX Reference Dye 2c

100μl

a. 包含缓冲体系、dNTP、特异性增强因子和SYBR® Green I荧光染料

b. 包含HiScript® II Reverse Transcriptase、RNase inhibitor以及Champagne TaqTM DNA Polymerase.

c. 用以校正孔与孔之间产品的荧光信号误差。使用ABI 7900HT/7300 Real-Time PCR System和StepOne PlusTM时使用50×ROX Reference Dye 1;ABI 7500,7500 Fast Real-Time PCR System, Stratagene Mx3000P使用50×ROX Reference Dye 2;Roche, Bio-Rad的Real-Time PCR仪不必使用ROX。

 

贮藏条件: -20℃。

 

 

质量控制

所有组分经检测均无核酸外切酶、核酸内切酶及RNase残留。

 

功能测试:以HeLa细胞总RNA为模板,1 pg-1 μg起始量的6个浓度梯度,扩增B2M基因。扩增效率在0.95-1.05之间,且模板量为1 pg时CT值在35以内。

注意事项

1. One Step SYBR® Green Enzyme Mix 含有高浓度的甘油,使用前请短暂离心,收集到反应管底部,并用移液枪轻轻吸打,充分混匀后准确吸取。

2. 使用2 ×One Step SYBR® Green Mix 时,请充分混匀后准确吸取,避免强光照射,并注意避光保存。

3. 反应液的配制请使用RNase-free 枪头、EP管等,尽量避免污染。

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