

搜索

科技成就健康生活

会员注册会员登录会员中心

查看购物车

中文 English

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

科学研究试剂高通量测试药物研发试剂分子诊断试剂动物疫病诊断生物耗材

科研试剂

产品分类 



高通量试剂

产品分类 



药物研发试剂

产品分类 



分子诊断试剂

产品分类 



动物疫病诊断

产品分类 



生物耗材

产品分类 



诺唯赞miRNA引物设计软件使用说明书.pdf

大小：

2021-02-26 09:23:19

下载
MR101说明书-V22.1.pdf

大小：

2022-05-27 09:46:01

下载

1/1

浏览量:

6378

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

microRNA 逆转录产品（茎环法）

价格：

700.0

市场价

元

0.0

浏览量:

6378

货号：

MR101-01/02

所属分类

miRNA逆转录专用试剂盒

数量：

库存:

79985

*具体价格咨询当地业务员



产品详情

FAQ

组分

说明书

相关文献

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop)

microRNA 逆转录产品（茎环法）

逆转录；miRNA茎环法合成cDNA一链（含gDNA去除）

· 优异的线性关系：在宽广的模板区间内具有良好的线性关系，可检出低至pg 级RNA 模板

· 优越的反应体系：适合的Buffer 组分及浓度，更适用于microRNA 的逆转录

· 简便的引物设计：提供配套的引物设计软件，使得引物设计更加简便

以小鼠肝脏组织Total RNA 的10 倍稀释梯度(10 pg-1 μg) 为模板，使用miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) (Vazyme #MR101) 进行逆转录，得到的cDNA 使用miRNA Universal SYBRqPCR Master Mix (Vazyme #MQ101)扩增mmu-miR-16 基因。结果显示，在宽广的模板区间内，该配套产品具有优异的线性关系。

miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by stem-loop) 是适用于茎环法miRNA cDNA 一链合成的专用试剂盒，含基因组DNA 去除步骤，可以在42℃ 2 min 条件下快速去除基因组DNA 的污染，保证后续结果更加可靠。试剂盒基于的HiScript II Reverse Transcriptase 具有较高的热稳定性，配以针对优化的缓冲体系，均有利于miRNA 特异性逆转录产物的生成。cDNA 产物后续定量，推荐使用本公司的miRNA Universal SYBR qPCR Master Mix (Vazyme # MQ101)，以获得优异的实验结果。同时，配套推出miRNA逆转录茎环引物和定量引物的设计软件，操作简单，为miRNA 实验保驾护航。

-20℃保存。

关键词:

MR101

miRNA cDNA第一链合成

去gDNA的miRNA 逆转录

miRNA逆转录

茎环法 miRNA 逆转录试剂

miRNA第一链cDNA合成

miRNA反转录

miRNA cDNA合成

cDNA合成

反转录试剂

RT-PCR

Q1、采用其他软件设计的茎环逆转录引物及定量引物，能否使用Vazyme #试剂盒（MR101+MQ101）？

A1：可以的。逆转录时可参照说明书直接投入其他软件设计的茎环逆转录引物（2μM浓度），且后续定量实验直接投入相应的定量上下游引物即可。注：若其他软件默认的茎环引物与Vazyme miRNA 引物软件默认的相同，后续搭配MQ101无需合成反向引物，可以使用MQ101自带的mQ Primer R；若茎环引物序列不同，则MQ101提供的mQ Primer R无需使用，需合成正反向引物。

Q2、内参是否需要设计茎环引物及如何逆转录和定量的引物如何使用？

A2：若选择U6等较长的基因作为内参基因，由于序列相对较长，无需设计茎环逆转录引物，直接使用常用的Primer Premier 5等软件设计即可，逆转录时投入内参下游引物（2μM浓度），且后续定量实验直接投入内参的上下游引物即可。如果选择长度较短的miRNA作为内参，需要设计茎环引物进行逆转录，推荐使用Vazyme miRNA 引物设计软件设计逆转录引物和qPCR引物。

Q3、如果要研究多个miRNA定量实验，是不是每个miRNA均要单独设计一条茎环引物进行逆转录？

A3：是的，针对每个miRNA都要设计一条茎环逆转录引物，一管反应中只能逆转一个miRNA（内参也是一样），即不同逆转录引物均需要分管逆转录。

Q4、在逆转录时，多个茎环逆转录引物/内参引物是否可以在同一管中进行？

A4：不推荐。在一管中同时投入多个茎环逆转录引物进行多个miRNA逆转录时，不同特异性茎环引物茎环结构之间会产生相互干扰和影响。

Q5、逆转录体系应该投入多少RNA？

A5：如果提取的是Total RNA，MR101可以兼容10 pg-1 μg的RNA投入量，但是不同miRNA表达丰度不同，建议尽量投入0.5-1 μg RNA。如果提取的是miRNA，逆转投入量参考1/10-1/5 total RNA的量加入，具体还是要根据目标miRNA的丰度来调整。

Q6、miRNA为什么要合成茎环引物？

A6：因为miRNA较短，如果使用普通逆转录和定量方法，无法设计定量引物，需要在逆转录阶段将cDNA延长

Q7：tsRNA如何进行逆转录反应？

A7：tsRNA是一类由tRNA衍生的非编码小RNA，通常长度为18 ~ 40 nt，在维持mRNA稳定性、调节翻译等过程中发挥重要作用。由于tsRNA长度过短，对其进行qPCR定量时，无法直接对tsRNA进行正、反向引物的设计（通常正向引物就足以覆盖tsRNA全长），因此可以使用增加逆转录产物长度的miRNA逆转录试剂盒来解决这一问题，miRNA的逆转录方法有两种，分别是茎环法和加尾法。Vazyme为您提供高特异性的茎环法逆转录产品MR101，及高通量的加尾法逆转录产品MR201均可对tsRNA进行逆转。