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Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase

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P502说明书-V22.1.pdf

大小：

2022-04-23 17:10:00

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浏览量:

3519

Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase

特异性高，准确还原您的DNA序列！

价格：

558.0

市场价

元

558.0

浏览量:

3519

货号：

P502-d1

所属分类

高保真PCR

数量：

库存:

19991

*具体价格咨询当地业务员

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说明书

相关文献

Phanta HS Super-Fidelity DNA Polymerase

特异性高，准确还原您的DNA序列！

菌落PCR；分子克隆；高GC体系；基因鉴定

高特异性：添加了单克隆抗体，可进行热启动PCR

高保真度：保真度是Taq DNA Polymerase 的52倍

扩增速度快：扩增速度是常规聚合酶的4-150 倍（扩增速度可达15 sec/kb）

模板适应性广：广泛适用于高GC含量等各种类型模板

使用PhantaHS Super-Fidelity DNA Polymerase和PhantaSuper-Fidelity DNA Polymerase以人基因组为模板扩增长度为8.5 kb的目标片段。相对于Phanta而言，PhantaHS具有更高的扩增效率和特异性。

本产品添加了延伸因子，并对反应体系进行了深度优化，具有较高的扩增效率和广泛的模板适应性，几乎适用于所有PCR反应。Phanta HS中添加了在常温下能够抑制其5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性的两种单克隆抗体，可进行高特异性的热启动（Hot Start）PCR。该酶具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，扩增产物为平端，适用于ClonExpress和拓扑克隆试剂盒（Vazyme #C112/C113/C115/C601）。

-20°C保存

关键词:

P502

热启动高保真聚合酶

热启动高保真DNA聚合酶

；热启动Pfu DNA高保真聚合酶

Pfu酶

热启动DNA聚合酶

热启动高保真酶

高保真phanta

phanta高保真酶

高保真PCR酶

PCR酶

菌落PCR；分子克隆；基因鉴定

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板的AT含量过高，可尝试使用针对高AT的产品（货号P501/P511）；模板为粗品，存在抑制物，建议降低模板浓度（稀释使用；若样本为植物叶片，要确保植物为非多糖多酚植物，取新鲜幼嫩的叶片，并将叶片面积剪小，如黄枪头尖部面积大小）；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符，如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活，温度过低则模板变性不彻底；若模板为酵母菌，可将预变性时间延长10min；退火温度不合适，可对退火温度设置梯度，摸索合适的退火温度；如果目的片段较长，可尝试Touch Down 程序；检查延伸时间是否充足。

(6) Mg²⁺浓度不合适

Mg²⁺浓度过低可影响PCR产量甚至使PCR扩增失败；Mg²⁺浓度过高会降低PCR的特异性，应适当调整Mg²⁺浓度。

Q2：扩增的条带亮度不太亮。

A2：(1) 引物

检查引物是否降解。

(2) 模板

首先确认模板的质量，长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；如果模板没有了，可用首次扩增产物按倍比稀释后作为模板进行二次扩增。

(3) 酶

可适当提高酶的使用量。

(4) 反应程序

可尝试使用Touch Down程序；延长延伸时间，提高循环数。

Q3：扩增特异性差，非特异性扩增。