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2 × Phanta Max Master Mix

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2 × Phanta Max Master Mix-V21.1.pdf

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2021-05-07 13:49:04

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2 × Phanta Max Master Mix

2×Phanta®MaxMasterMix 最强模板兼容性的新一代高保真DNA聚合酶超保真度保真度是TaqDNAPolymerase的53倍，PfuDNAPolymerase的6倍每扩增300,000个碱基，错配少于5个扩增更快极限速度可达0.5sec/kb，30sec/kb可高效扩增绝大多数片段扩增更长质粒、λDNA等简单模板有效扩增长度可达40kb，cDNA有效扩增长度可达10kb

价格：

615.0

市场价

元

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货号：

P515-01/02/03

所属分类

高保真PCR

数量：

库存:

269970

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产品详情

FAQ

组分

说明书

2 × Phanta^® Max Master Mix

最强模板兼容性的新一代高保真DNA聚合酶

超保真度: 保真度是 Taq DNA Polymerase 的 53 倍， Pfu DNA Polymerase 的 6 倍。每扩增 300,000 个碱基，错配少于 5 个
扩增更快: 极限速度可达 0.5 sec/kb，30 sec/kb 可高效扩增绝大多数片段
扩增更长: 质粒、λ DNA 等简单模板有效扩增长度可达 40 kb， cDNA 有效扩增长度可达 10 kb，基因组有效扩增长度可达 20 kb
适应度广: 适用于各种 GC 含量片段扩增，对 PCR 抑制剂具有超强的耐受度，可用于多种样本的直接 PCR

1.值得信赖的扩增保真度

图1

2.优异的高GC 扩增能力

以人基因组为模板扩增 654 bp、 900 bp、 800 bp、 1,200 bp、 1,400 bp、426 bp 目标片段，各扩增子 GC 含量均高于 68%。

图2

3.稳定的粗品扩增能力

图3

Phanta^® Max 中添加了独特的延伸因子、特异性促进因子以及平台期解抑制因子，使其长片段扩增能力、扩增特异性以及扩增产量方面得到了大幅度提升。使用λDNA、质粒等简单模板，Phanta^® Max 可以有效扩增长达40 kb 的片段；使用基因组DNA等复杂模板，Phanta^® Max 可以有效扩增长达20 kb 的片段；使用cDNA 模板，Phanta^® Max 可以有效扩增长达10 kb 的片段。其扩增错配率是普通Taq 聚合酶的1/53，是Pfu 聚合酶的1/6。此外，Phanta^® Max 对PCR 抑制剂具有良好的抵抗能力，可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。Phanta^® Max 中添加了在常温下能够抑制其5’ → 3’ 聚合酶活性和3’ → 5’ 外切酶活性的两种单克隆抗体，可进行高特异性的热启动PCR。该酶具有5’ → 3’ 聚合酶活性和3’ → 5’ 外切酶活性，扩增产物为平端，适用于ClonExpress^®和拓扑快速克隆试剂盒(C112/C113/C115/C601)。

组分	P515-01	P515-02	P515-03
2 × Phanta^® Max Master Mix	1 ml	5 × 1 ml	15 × 1 ml

-20°C保存

关键词:

P515

最强模板兼容性的新一代高保真DNA聚合酶

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板为粗品，存在抑制物，建议降低模板浓度（稀释使用；若样本为植物叶片，要确保植物为非多糖多酚植物，取新鲜幼嫩的叶片，并将叶片面积剪小，如黄枪头尖部面积大小）；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符，如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活，温度过低则模板变性不彻底；若模板为酵母菌，可将预变性时间延长10min；退火温度不合适，可对退火温度设置梯度，摸索最佳的退火温度；如果目的片段较长，可尝试Touch Down 程序；检查延伸时间是否充足。

Q2：扩增的条带亮度不太亮。

A2：(1) 引物

检查人工合成的引物是否降解。

(2) 模板

首先确认模板的质量，长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；如果模板没有了，可用首次扩增产物按倍比稀释后作为模板进行二次扩增。

(3) 反应程序

可尝试使用Touch Down程序；延长延伸时间，提高循环数。

Q3：扩增特异性差，非特异性扩增。

A3：(1) 引物

引物设计不够优化。引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体，可降低引物浓度进行优化，必要时重新设计引物。

(2) 模板

模板不纯，被污染，需重新制备模板。