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FastPure Bacteria DNA Isolation Mini Kit

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  • cp

    FastPure Bacteria DNA Isolation Mini Kit-V20.1.pdf

    大小:
    2020-10-16 17:18:47
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浏览量:
2976

FastPure Bacteria DNA Isolation Mini Kit

简单便捷,针对细菌样本提取
价格:
¥
665.0
市场价
665.0
浏览量:
2976
货号:
DC103
所属分类
柱式提取
数量:
-
+
库存:
9997
*具体价格咨询当地业务员
暂时无货
1
产品详情
FAQ
组分
说明书
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FastPure Bacteria DNA Isolation Mini Kit

简单便捷,针对细菌样本提取

细菌DNA提取;产物可用于酶切;PCR;Southern杂交;qPCR;文库构建;二代测序

·  简单快速:30min内即可获得数个细菌样品的基因组DNA。

·  适用范围广:适用于革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌基因组DNA提取。

·  得率高,完整性好:提取的基因组DNA产量高,完整性好。

·  纯度高:提取的DNA纯度高,可直接用于各种下游反应。

1.产量高、完整性好

使用细菌基因组DNA 提取试剂盒(Vazyme #DC103)以及市售其他品牌细菌基因组DNA提取试剂盒(分别来自Supplier T、C、O),提取不同来源的细菌基因组DNA。

起始量:金黄色葡萄球菌(4.0×108 cells),大肠杆菌DH5α(4.5×108 cells),大肠杆菌Fast T1(4.5×108cells),洗脱体积70 μl,DNA上样量2 μl。琼脂糖凝胶浓度为1%。

M:DL 15000 DNA Marker ( Vazyme #MD103 )

 

2.纯度高

 

 

Vazyme #DC103

T公司

浓度

66.96ng/μl

63.75ng/μl

OD260/280

1.802

1.830

OD260/230

1.371

0.870

 

分别使用Vazyme #DC103与T公司相关产品提取等起始量大肠杆菌DH5α的基因组DNA,通过OneDrop测定基因组DNA 的浓度与纯度。

通过OneDrop对Vazyme #DC103与T公司提取的细菌基因组DNA测定,可以看出Vazyme #DC103的纯度更高。

本试剂盒采用硅胶膜纯化技术,30 min内可从各种来源细菌(革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌)中提取高质量基因组DNA。提取过程中无需使用酚氯仿等有毒试剂,也无需进行耗时的醇类沉淀,并较大限度去除RNA、杂蛋白、脂类及其他抑制性杂质。提取的基因组DNA纯度高,质量稳定,可用于酶切、PCR、Southern杂交等下游实验。

RNase A及Proteinase K干粉于-30~-15℃保存。

其他组分室温(15-25℃)保存。

 

 

 

关键词:
DC103
核酸提取
基因组DNA提取
细菌DNA提取
DNA提取
细菌基因组DNA提取
细菌gDNA提取
柱式DNA提取
提取
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Q1:柱子堵塞

A1:(1) 样品用量过多:减少样品用量,使用量应小于1.0×109个细菌;

(2) 消化液中存在不消化的物质:若样品消化后,溶液中存在明显的颗粒物质,可于12,000 rpm离心3 min去除未消化的物质。

 

Q2:DNA产量低

A2:(1) 样品使用量过少:根据细菌培养情况来确定细菌用量,有些细菌培养后浓度低,可适当增加细菌用量;

(2) 革兰氏阳性菌破壁不完全:可适量增加Lysozyme的用量或延长酶消化时间;

(3) Proteinase K保存不当导致其活性降低或失活:Proteinase K溶解后应分装置于-20℃保存;

(4) 洗脱液问题:请使用Elution Buffer洗脱,若用ddH2O或其他洗脱液,确认洗脱液pH值在7.0-8.5之间;

(5) 洗脱不充分:洗脱液需加值吸附膜中央位置,增加洗脱体积或增加洗脱次数;

(6) Buffer PB/PW为添加无水乙醇。请参考试剂瓶标签说明加入正确体积的无水乙醇。

 

Q3:DNA纯度低

A3:(1) 样品裂解不充分:样品与Buffer GB混匀不充分,重新提取并振荡使样品与Buffer GB充分混匀,或样品用量太多,减少样品用量;

(2) 杂蛋白污染、RNA污染:未使用Buffer PB洗涤吸附柱,或用Buffer PB洗涤吸附柱时没有使用正确的离心转速。在上清液过柱时尽量保证上清液中无沉淀;务必按说明书用Buffer PB洗涤吸附柱,并且此步骤不能省略;

(3) 杂质离子污染:省略了Buffer PW洗涤吸附柱或者只洗涤了一次。按说明书使用Buffer PW洗涤两次,尽量去除残留的离子;

(4) 乙醇残留:Buffer PW洗涤吸附柱后,没有进行空管离心操作。请按照说明书进行空管离心操作。

 

Q4:DNA 溶液带颜色或膜上有色素残留是什么原因造成的

A4:(1)漂洗次数不够:步骤7完成后,加 500 μl 无水乙醇再漂洗一遍;

(2)样品起始量过多:减少样品起始量,避免过量。

 

Q5:DC103能不能提菌斑

A5:DC103研发端测试过大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,<1.0×10^9个细菌,

大肠杆菌过夜摇2 ml 约可提取10μg DNA。

 

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