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FastPure Plasmid Mini Kit

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FastPure Plasmid Mini Kit-V21.2.pdf

大小：

2021-09-13 10:30:50

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浏览量:

6215

FastPure Plasmid Mini Kit

质粒DNA小提试剂盒

价格：

240.0

市场价

元

240.0

浏览量:

6215

货号：

DC201-01

所属分类

柱式提取

数量：

库存:

9990

*具体价格咨询当地业务员

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产品详情

FAQ

组分

说明书

相关文献

FastPure Plasmid Mini Kit

质粒DNA小提试剂盒

质粒DNA提取；产物可用于产物用于酶切；PCR；测序；连接转化

· 简单快速：无需柱平衡，操作简单快速，30 min即可完成多个样品的抽提工作。

· 纯度高：提取的质粒可直接进行测序、酶切、PCR等实验。

· 产量高：每个吸附柱可吸附高达35 μg的质粒DNA。

使用FastPurePlasmid Mini Kit 分别提取大小为3.0 kb、5.4 kb、7.0 kb、10.0 kb不同大小质粒，琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果显示本试剂盒针对不同大小的质粒均具有较好的提取效果，提取产量高。

M: 1 kb DNA Ladder (Vazyme #MD105)

将上述提取的5.4 kb、10.0 kb 质粒分别进行单酶切，琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果显示提取的质粒纯度高，对下游酶切反应无抑制作用。

M: DL15000 DNA Marker (Vazyme #MD103)

本产品适用于提取1-5 ml过夜培养的菌液，采用优化的SDS-碱裂解法裂解细胞，提取过程无需酚/氯仿抽提、乙醇沉淀等步骤，仅需30 min即可完成多个样品的抽提工作。本品采用独特的离心吸附柱，可高效特异的结合溶液中的质粒DNA，并较大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质，进而得到高质量、高纯度的质粒DNA。后续可直接用于酶切、PCR、测序、转化等生物学实验。

请将RNase A保存于-20℃,其他组分室温（15-25℃）保存。

关键词:

DC201

质粒DNA提取

质粒小提

质粒分离

质粒抽提

质粒提取

质粒DNA小提

质粒DNA

柱式提取

质粒小量提取

高纯质粒小提

质粒纯化

质粒DNA纯化

质粒小量纯化

质粒DNA小量纯化

DNA提取

提取

Q1：低拷贝质粒或大质粒(>10 kb)提取

A1：若所提质粒拷贝数较低或大于10 kb的大质粒，应加大菌体使用量，使用5 ml-10 ml过夜培养的菌液，同时按照比例增加Buffer P1、Buffer P2、Buffer P3的用量，洗脱缓冲液Elution Buffer应在55℃水浴锅预热，同时在吸附和洗脱时可以适当地延长时间，以增加提取效率。

Q2：DNA 产量低

A2：（1）质粒拷贝数：

载体因拷贝数差异会造成质粒产量明显的波动。高拷贝数的载体常有2-3倍的产量波动，(每毫升培养过夜的菌液，高拷贝数的质粒载体产量为3-16 μg)。长片段质粒和表达型载体常以中低拷贝数为主，每毫升菌液的产量约为0.5~2 μg；

◇低拷贝质粒：pBR322, pACYC 及其衍生载体，pSC101 及其衍生载体，SuperCos, pWE15；

◇高拷贝质粒：pTZ, pUC, pBS, pGM-T；

（2）菌种问题：

菌种保存过程中存在质粒丢失现象，培养细菌前最好先划线活化，以稳定产量；

（3）细菌未充分裂解：

细菌须在Buffer P1/RNase A 中充分重悬，成团的细菌因无法裂解会降低产量；

（4）试剂准备有误：

Buffer P2在低温时有沉淀析出，需加热溶解或放置37℃ 恒温箱中至清亮方可使用。Buffer PW 加入乙醇体积不准确(乙醇浓度需控制在80%)；

（5）长片段质粒DNA。长片段质粒常以中低拷贝数为主，可提升菌液添加量至10 ml以提高产量；