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VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina

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    NR801说明书-V22.1.pdf

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    2022-07-05 14:46:11
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VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina

VAHTSTM SmallRNALibraryPrepKitforIllumina®smallRNA-seq文库构建试剂盒样本兼容范围广种类广:动、植物细胞/组织总RNA,分离纯化的smallRNA,以及其他类型的总RNA(如外泌体总RNA),均可作为起始模板;起始量广:兼容100ng-1μg总RNA的投入量。文库丰度高:接头污染少,最终有效文库比例高,miRNA比例高、涵盖种类多。多种纯化方式可
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组分
说明书
VAHTS® Small RNA Library Prep Kit for Illumina

small RNA-seq文库构建试剂盒

样本兼容范围广:

种类广:动、植物细胞/组织总RNA,分离纯化的small RNA,以及其他类型的总RNA(如外泌体总RNA),均可作为起始模板;

起始量广:兼容100 ng-1 μg总RNA的投入量。

文库丰度高:

接头污染少,最终有效文库比例高,miRNA比例高、涵盖种类多。

多种纯化方式可选:

试剂盒包含文库构建所需的所有组分,提供磁珠分选和PAGE胶分离两种文库纯化方式,可根据初始文库质量任意选择。

精心优化的反应体系:

单管操作,文库产量高,平行重复相关性好。

 

图A:以1 μg小鼠肝脏总RNA为起始模板的small RNA文库;

图B:以1 μg小鼠肝脏总RNA为起始模板的small RNA文库经PAGE分离后的最终文库;

图C:以80 ng HeLa细胞培养物上清外泌体总RNA为起始模板的samll RNA文库。

VAHTS® Small RNA Library Prep Kit for Illumina是针对Illumina高通量测序平台定向开发的small RNA文库构建专用试剂盒。本试剂盒适用于模板起始量为0.1-1 μg的动、植物总RNA,以及分离纯化的small RNA。small RNA的3’和5’端分别连上通用接头,再经过逆转录、PCR扩增以及PAGE胶或磁珠纯化等步骤,最终得到适用于Illumina平台的测序文库。试剂盒包含文库构建及纯化所需的所有酶和缓冲液,所有组分都经过了严格的质量控制和功能验证,最大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

RL5 Adaptor,-85 ~ -65℃保存,干冰运输;
Filtration Column,15 ~ 25℃保存,室温运输;
其余组分,-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。
关键词:
VAHTS Small RNA Library Prep Kit for Illumina®
NR801-01/02
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Q1:small RNA建库上机策略?

A1:单端测序,采用双端测序会导致数据量偏低

 

Q2:small RNA建库,能否不采用切胶方法,而采用磁珠分选的方法?

A2:磁珠分选的方法不能得到单一的目的条带,建议使用切胶方式

 

Q3:除Ttrizol裂解法提取总RNA外,能否使用离心柱法提取的总RNA作为起始模板?

A3:本试剂盒对总RNA的提取方式无特殊要求,如使用离心柱法提取试剂盒提取总RNA,请确保所使用的提取试剂盒不会损失small RNA。

 

Q4:RT primer能否在cDNA合成步骤添加?

A4: 不能。3’接头连接完成后加入的RT primer与多余3’接头反向互补形成双链结构,可以有效阻止5’接头与3’接头连接,从而减少接头二聚体的形成;另外,RT primer与已连上3’接头的RNA底物方向互补可作为逆转录步骤的引物,因此RT primer必须在3’接头连接完成之后添加,不能在cDNA合成步骤才添加。

 

Q5:除常规的动植物总RNA外,其他类型的总RNA是否可以作为起始模板进行文库构建?

A5:除动、植物总RNA以及分离纯化的small RNA外,本试剂盒可以兼容其他类型的总RNA,比如外泌体总RNA作为起始模板。

这是描述信息
VAHTS DNA Clean Beads
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