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T4 Polynucleotide Kinase-V21.1.pdf
大小：2021-11-12 10:24:38
T4 Polynucleotide Kinase
T4 Polynucleotide Kinase
用于5’磷酸化
DNA 或 RNA 5´ 末端的磷酸化；DNA 或 RNA 的末端标记；除去 3´ 磷酸基团；建库中主要进行插入片段5' 磷酸化； 3´ 去磷酸化
· DNA或RNA 5′末端磷酸化，以便进行连接反应
· DNA或RNA的末端标记，用作探针和进行DNA测序
T4 Polynucleotide Kinase能够催化ATP的γ-磷酸基团转移到寡核苷酸链(双链或单链DNA或RNA)的5´-羟基末端以及3´-单磷酸核苷上。T4 Polynucleotide Kinase还具有3´-磷酸酶活性，将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
贮存缓冲液
50 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 μM ATP, 50% glycerol
反应缓冲液 (10 × T4 PNK Buffer)
700 mM Tris-HCl pH 7.6, 100 mM MgCl2, 50 mM DTT
来源
克隆有来自T4噬菌体Polynucleotide Kinase基因的重组E. coli菌株。
单位定义
37℃、30分钟内使1 nmol的[γ-32P] ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。
-20℃保存。
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