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2 × Phanta Max Master Mix (Dye Plus)

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P525（单页）V23.1.pdf

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2023-04-28 11:18:01

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2 × Phanta Max Master Mix (Dye Plus)

高效扩增，轻松拿捏长达40 kb的λDNA/质粒和20 kb的gDNA

价格：

615.0

市场价

元

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4911

货号：

P525-01/02/03

所属分类

高保真PCR

数量：

库存:

2429242

*具体价格咨询当地业务员

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产品详情

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组分

说明书

相关文献

2 × Phanta Max Master Mix (Dye Plus)

高效扩增，轻松拿捏长达40 kb的λDNA/质粒和20 kb的gDNA

分子克隆；基因鉴定；多重PCR；高AT/GC体系

· 保真度高：保真度是 Taq DNA Polymerase 的 128 倍

· 扩增更快：30 sec/kb 可高效扩增绝大多数片段

· 扩增更长：质粒、λ DNA 等简单模板有效扩增长度可达 40 kb，基因组有效扩增长度可达 20 kb，cDNA 有效扩增长度可达 10 kb

· 适应度广：GC含量兼容范围 24-83%，兼容粗品和样本直扩

· 操作便捷：加入引物和模板即可进行扩增，产物含紫红色Loading Buffer可直接进行电泳

1.保真度高

采用二代测序方法（P. Mielinis. et al. Journal of Molecular Biology (2021)），测定不同聚合酶的扩增保真度。结果显示，Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase保真度是Taq DNA Polymerase的128倍。

2.广泛的模板兼容性

针对四种不同类型的DNA模板，采用P525和Vazyme #P515分别进行PCR扩增，结果如上图展示，P525和Vazyme #P515对这四种不同类型的DNA模板均有良好的扩增性能。

3.稳定的粗品扩增能力

分别以血液、小麦(叶)、鼠尾以及菌液为DNA模板，使用P525和Vazyme #P515进行PCR扩增，结果如上图展示，P525和Vazyme #P515均有良好的扩增性能。

4. GC兼容性

Phanta Max Super-Fidelity DNA Polymerase能够高效扩增常规聚合酶无法正常扩增的高GC片段。以200 ng人基因组DNA为模板，采用P525和Vazyme #P515分别扩增GC含量为60.7% (8 kb)、68.3% (7 kb)和75.7% (3 kb)的DNA片段，结果如上图展示，P525与Vazyme #P515均具有良好的扩增性能。

5.优异的扩增成功率和产量

分别采用P525和Vazyme #P515以及市售高保真酶(TB公司、TA公司、N公司、T公司、QK公司、TG公司)进行不同模板的PCR扩增；结果如上图展示，P525与Vazyme #P515扩增性能优异，扩增子产量高、特异性好。

6.高灵敏度

分别采用P525和Vazyme #P515扩增不同投入量的质粒，结果如上图展示，P525具有较高的灵敏度。在质粒模板投入量为1 pg 时，都有扩增条带，P525的灵敏度高于P515。当模板投入量大于10pg时，P525和P515的扩增性能无差别。

本产品添加了延伸因子、特异性促进因子以及平台期解抑制因子，使其在长片段扩增能力、扩增特异性以及扩增产量方面得到了大幅度提升。保真度是Taq酶的128倍，可进行高特异性的热启动PCR。本产品只需加入引物和模板即可进行扩增，减少了移液操作，提高了检测通量和结果的重现性。体系中包含电泳指示剂，可在PCR反应完成后直接点样进行电泳。产品经反复冻融后仍能保持稳定的活性。

组分	P525-01	P525-02	P525-03
2 × Phanta Max Master Mix (Dye Plus)	1 ml	5 × 1 ml	15 × 1 ml

- 20℃保存。

关键词:

P525

超高保真DNA聚合酶预混液

超高保真酶mix

超高保真DNA聚合酶mix

超高保真聚合酶预混液

超高保真PCR mix

高保真mix

Phanta高保真mix

PCR酶；菌落PCR

分子克隆；基因鉴定；样本直扩；多重PCR

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板为粗品，存在抑制物，建议降低模板浓度（稀释使用；若样本为植物叶片，要确保植物为非多糖多酚植物，取新鲜幼嫩的叶片，并将叶片面积剪小，如黄枪头尖部面积大小）；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符，如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活，温度过低则模板变性不彻底；若模板为酵母菌，可将预变性时间延长10min；退火温度不合适，可对退火温度设置梯度，摸索合适的退火温度；如果目的片段较长，可尝试Touch Down 程序；检查延伸时间是否充足。

Q2：扩增的条带亮度不太亮。

A2：(1) 引物

检查人工合成的引物是否降解。

(2) 模板

首先确认模板的质量，长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；如果模板没有了，可用首次扩增产物按倍比稀释后作为模板进行二次扩增。

(3) 反应程序

可尝试使用Touch Down程序；延长延伸时间，提高循环数。

Q3：扩增特异性差，非特异性扩增。

A3：(1) 引物

引物设计不够优化。引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体，可降低引物浓度进行优化，必要时重新设计引物。

(2) 模板

模板不纯，被污染，需重新制备模板。