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VAHTS Universal V6 RNA-seq Library Prep Kit for MGI

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NRM604说明书-V22.2.pdf

大小：

2023-01-05 10:59:46

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VAHTS Universal V6 RNA-seq Library Prep Kit for MGI

针对MGI高通量测序平台定向开发的转录组文库构建专用试剂盒

价格：

11800.0

市场价

元

11800.0

浏览量:

1473

货号：

NRM604-01/02

所属分类

RNA建库试剂盒

数量：

库存:

39996

*具体价格咨询当地业务员

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产品详情

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组分

说明书

相关文献

VAHTS Universal V6 RNA-seq Library Prep Kit for MGI

RNA文库构建；基因表达分析；单核苷酸变异分析；可变剪切分析；融合基因检测；目标转录组分析

· 快速：简单的操作流程，使建库时间缩短了 2 h

· 兼容：兼容多种 RNA 富集模块，随心搭配

· 通用：灵活自由的选择链特异或非链特异文库

VAHTS Universal V6 RNA-seq Library Prep Kit for MGI是针对MGI高通量测序平台定向开发的转录组文库构建专用试剂盒。试剂盒包含两种类型的cDNA二链合成Buffer，可根据需要选择进行普通转录组或链特异转录组建库。试剂盒将二链合成、末端修复和dA-Tailing合并为一步，中间不需要纯化步骤，简化了操作流程，缩短了建库时间。优化的反应体系，提高了文库转化效率，能兼容更低起始投入量，对不同起始量的RNA都有均一的覆盖度。本试剂盒利用磁珠分选的方式，可以快速获得特定长度的文库，能够满足不同实验的个性化需求。试剂盒包含的所有酶和缓冲液都经过了严格的质量控制和功能验证，较大程度上保证了文库构建的稳定性和重复性。

-30 ~ -15℃保存。

关键词:

vahts

600

buffer

试剂盒

strand

文库

mix

mgi

RNA文库构建

Q1: RNA样品质控

A1:为保证建库质量，在实验开始前必须对RNA样品进行质控，RNA样品总量、纯度须满足以下条件：

a).总RNA模板的起始投入量应≥ 50 ng ，若起始投入量过低，不能确保得到足够的mRNA用于后

续文库构建。

b).OD260/OD280比值应介于1.8 - 2.1之间，若比值＞ 2.1则RNA样品中可能有基因组污染，若比值＜ 1.8则可能有蛋白质污染；OD230/OD260比值应介于0.4 - 0.5之间，若比值＞ 0.5则可能RNA样品中有盐或小分子杂质污染，比值＜ 0.4可能有基因组污染。

Q2: RNA样品准备

A2:a).混匀含RNA样品的溶液时应小心操作，轻柔吹打，切勿涡旋振荡，否则会使RNA断裂，影响

文库片段大小；

b).经Poly(A)法富集的mRNA或去除rRNA后的RNA应尽快进行后续操作，避免RNA降解。

c).如果RNA的初始浓度较低时，可使用冻干、乙醇沉淀、过柱回收或VAHTS® RNA Clean Beads

(Vazyme #N412)磁珠纯化等方法浓缩RNA。

Q3: DNA纯化磁珠的注意事项

A3:a). 磁珠从2 ~ 8℃取出后应平衡至室温，否则影响磁珠的抓取效率。

b).每次吸取磁珠前都应将其涡旋振荡充分混匀。

c).样品与磁珠充分混匀后置于磁力架上进行分离时，待溶液彻底澄清后再吸取上清，吸取上清时应余留2 - 3 μl。若不慎吸到磁珠，会造成得率下降、分选效果不佳等问题，甚至影响后续酶反应，此时可将磁珠混匀重新置于磁力架上再次分离即可。由于磁力架吸力不同等原因，默认分离时间有时可能需要延长，以彻底分离磁珠和液体。

d).使用新鲜配制的80%乙醇漂洗磁珠，久置的80%乙醇会导致杂质残留以及文库产出降低。漂洗过程中EP管应始终置于磁力架中，请勿扰动磁珠。

e).第二遍80%乙醇漂洗磁珠操作，应尽量吸干上清，减少杂质残留。

f).产物洗脱前应将磁珠置于室温干燥。干燥不充分容易造成无水乙醇残留影响后续反应；过分干燥又会导致磁珠开裂进而降低纯化得率。通常情况下，室温干燥5 - 10 min足以让磁珠充分干燥，请勿加热干燥(如置于37℃烘箱干燥)。

Q4.其他注意事项

A4:a). 使用前请将试剂盒各组分置于冰上解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后

置于冰上待用。

b).建议使用带滤芯的吸头，在吸取不同样品时更换吸头。

c).在二链合成前使用的耗材必须为RNase-free，二链合成及之后为DNase-free。

d).实验过程中务必使用新鲜的Nuclease-free H2O，建议分装至小管中逐个取用，用后弃去。

e).务必佩戴手套操作，接触RNase-free空间外设备或其他工作区间后，请更换手套。

f).所有的试剂使用后务必立即盖上盖子，避免污染。

g).推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。