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FastPure Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA Isolation Mini Kit

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  • cp

    FastPure Blood Cell Tissue Bacteria DNA...-V21.1.pdf

    大小:
    2021-04-09 16:15:15
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1458

FastPure Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA Isolation Mini Kit

价格:
¥
800.0
市场价
800.0
浏览量:
1458
货号:
DC112-01/02
所属分类
柱式DNA提取
数量:
-
+
库存:
1998
暂时无货
1
产品详情
FAQ
组分
说明书

FastPure® Blood/Cell/Tissue/Bacteria DNA Isolation Mini Kit

快速纯化血液/细胞/组织/细菌基因组DNA试剂盒

质量高、完整性好:提取的DNA具有产量高,纯度好,片段完整等特点

样本适用范围广:适用于从多种新鲜或冻存的抗凝血、细胞、动物组织及细菌样本中直接提取DNA。

简便快捷:动物组织提供30min快速提取方案。

DNA完整性好

分别使用Vazyme #DC112(下图简称:V)与Q、Ti、O、C公司和本公司相关产品提取人293细胞、大鼠肝组织、大肠杆菌DH5α及金黄色葡萄球菌样本基因组DNA,并进行1%琼脂糖凝胶电泳。从下图中可以看出,Vazyme #DC112提取的DNA产量高,纯度高,完整性好。

M:DL2000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。人293细胞约2.5×10^6,洗脱体积100 μl,上样量1 μl。

M:DL2000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。大鼠肝组织约10mg,洗脱体积100 μl,上样量2 μl。

M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。DH5α,OD600=0.65,1.5 ml,洗脱体积100 μl,上样量2.2 μl。

M:DL15000 DNA Marker(Vazyme #MD101)。金黄色葡萄球菌,OD600=0.5,1 ml,洗脱体积100 μl,上样量2 μl。

DNA产量高、纯度好

分别使用Vazyme #DC112(下图简称:V)与Q、Ti、O、C公司和本公司相关产品提取人293细胞、大鼠肝组织、大肠杆菌DH5α及金黄色葡萄球菌样本基因组DNA,分别对DNA产物进行浓度和纯度检测,从图中可以看出Vazyme #DC112提取不同样本的基因组DNA与市售其他产品相比,产量更高。OD260/280及OD260/230数值更接近标准数值,纯度更好。

样本兼容性广

使用Vazyme #DC112(下图简称:V)按照说明书操作纯化以下样本基因组:(血液)200 μl人的EDTA、肝素钠、枸橼酸钠抗凝管血液样品、200 μl猪血、20 μl鸡血, (细菌)DH5α、金黄色葡萄球菌、271、275菌,(细胞)人293细胞、小鼠杂交瘤细胞、仓鼠Cho-K1,(组织)大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、小鼠脂肪、扇贝、鼠尾,100 μl洗脱, 1%琼脂糖凝胶电泳检测,上样量约为160-180 ng。M DL15000 Marker (MD103)。结果显示本试剂盒样本兼容性广泛,可对不同物种的基因组DNA进行高质量的提取纯化。

下游兼容性广

分别使用DC112提取大鼠心、肝、脾、肺、肾和脑组织中的基因组DNA进行下游PCR检测(普通PCR),并对产物进行琼脂糖凝胶电泳,从图中可以看出PCR产物条带清晰且单一,说明可以兼容下游PCR检测。

 

模板:2μl   Mix:P525  上样体积:10μl

分别使用Vazyme #DC112与Q、Ti、O、C公司相关产品提取人293细胞的基因组DNA后,以此为模板进行多重PCR检测,并对产物进行琼脂糖凝胶电泳,从图中可以看出同时进行多重PCR检测,产物条带清晰,说明可以兼容下游多重PCR检测。

模板:人293细胞100 ng  Mix:PM101  上样体积:5μl

本试剂盒主要适用于从多种新鲜或冻存的抗凝血、细胞、动物组织及细菌样本中提取基因组DNA。试剂盒采用硅胶膜纯化技术,提取过程中无需使用酚氯仿等有毒试剂,也无需进行耗时的醇类沉淀,并最大限度的去除RNA、杂蛋白、脂类及其他抑制性杂质。提取的基因组DNA纯度高,质量稳定,可用于酶切、PCR、Southern杂交等下游实验。

组分 DC112-01(50 rxn) DC112-02(200 rxn)
Buffer ACL 12 ml 48 ml
Proteinase K 1 ml 4 ml
Buffer BCL 12 ml 48 ml
Buffer WA 15 ml 60 ml
Buffer WB 20 ml 2 × 40 ml
Elution Buffer 20 ml 80 ml
FastPure® gDNA Mini ColumnsⅡ 50 个 2 × 100 个
Collection Tubes 2 ml 50 个 2 × 100 个

Proteinase K于2 - 8℃保存,其他组分室温(15 - 25℃)保存。

关键词:
细胞血液DNA提取试剂盒
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:提取的DNA存在降解

A1:(1)样本采集与保存降解:

          1. 应尽可能选择新鲜的样本;

          2. 样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准;

          3. 样品保存时要尽可能的避免反复冻融;

(2)样本前处理不当:

         1. 选择合适的处理方式并进行充分的样本前处理;

         2. 前处理结束后在样本解冻前添加裂解液;

(3)样本裂解:

        1. 需对样本进行充分裂解;

        2. 正确添加所需试剂种类及使用量,样本量增加时裂解液也需成倍增加;

(4)样品保存:

对得到的DNA产物进行分装保存,避免反复冻融且保存时间不易太久。

 

Q2:提取的DNA产量低

A2:(1)样本采集与保存:

         1. 事先了解提取样本中DNA含量水平;

         2. 样本保存时要尽可能的避免反复冻融,保存时间不宜太久;

         3. 样本投入量适量,不宜过多或过少;

(2)样本前处理和裂解:

选择合适的前处理及裂解方式(比如延长裂解和沉淀DNA的时间等),避免堵柱,并尽可能的将样本中的DNA完全释放出来;

       1. 细胞/组织样本:延长消化时间让样品充分消化,或玻璃匀浆器对样品进行匀浆;

       2. 细菌样本:

           a. 革兰氏阳性菌破壁不完全,可适量增加Lysozyme 的用量或延长酶消化时间;

           b. 首先需要询问客户菌液培养的时间,一般12-16h即可,时间过长会导致细菌死亡,菌体破裂,内容物析出DNA溶于水中,在收集菌体时随着上清被丢弃,故导致产量低;

           c. Proteinase K 保存不当导致其活性降低或失活;

           d. 血液样品:确认Proteinase K 的保存条件或更换新的 Proteinase K 进行消化反应;

(3)提取纯化:

        1. 使用沉淀法提取DNA时,可以1/10体积的醋酸钠(pH5.2)有助于DNA沉淀;

        2. 在消化液中加入有乙醇后有沉淀析出时,用移液枪吸打几次打散沉淀有利于提高产量;

        3. 洗脱buffer中无水乙醇添加量不准确,按照说明书正确添加无水乙醇;

        4. 添加洗脱液前过度干燥吸附柱:开盖时间不宜超过5min,否则易造成DNA洗脱困难;

        5. 洗脱液问题:请使用Elution Buffer洗脱;若用ddH2O或其他洗脱液时,确认其PH值在7.0-8.5之间;

        6. 洗脱不充分:使用柱式试剂盒对DNA产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。 

 

Q3:提取的DNA纯度低,影响下游实验结果

A3:整体原则:

  1. 样本投入量不要太多;
  2. 样本应进行充分裂解:

不同污染:

  1. RNA残留:

使用RNase对RNA进行处理,处理时间不宜太短,富含RNA 样品如肝脏、肾脏,培养细胞富含RNA,可延长RNase Solution消化时间至60 min;

  1. 蛋白残留:

①使用蛋白变性剂或蛋白酶K;

②未使用Buffer WA漂洗,或Buffer WA中未加入正确体积的无水乙醇。请按瓶身标签加入指定体积的无水乙醇后操作;

(3)盐离子残留:

未使用Buffer WB漂洗,或只漂洗一次。请按照说明书使用Buffer WB漂洗两次;

(4)乙醇残留:

吸附柱在洗脱前,未空管离心去除乙醇。请按照说明书空管离心后打开吸附柱管盖,室温放置2-5 min让乙醇彻底挥发。

 

Q4:吸附柱堵塞

A4:(1)样本投入量太多:请按照兼容范围投入样本;

(2) Proteinase K活性下降:更换新的Proteinase K,使用后的Proteinase K必须保存于2-8℃;

(3)样本裂解不充分:延长56℃水浴时间,增加颠倒混匀次数。

 

Q5:DC112可以提血清DNA吗?

A5:没有测试过。

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