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    Bst DNA Polymerase Large Fragment-V21.1.pdf

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    2021-06-10 17:42:31
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Bst DNA Polymerase Large Fragment

Bst DNA Polymerase Large Fragment 等温扩增用酶 具有较强的链置换活性 Bst DNA Polymerase Large Fragment 是 Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分, 具有5´→ 3´DNA聚合酶活性,以及较强的链置换 (strand displacement)活性,但缺失5´→ 3´核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应,例如LAMP (Loop-mediated isothermal amplification), RCA (Rolling-circle amplification)等。 组 分 P701- 01 800 U P701- 02 8,000 U Bst DNA Polymerase Large Fragment a (8 U/μl) 100 μl 1 ml 10 × ThermoPol Buffer b 1 ml 3 × 1 ml MgSO4 (100 mM) 1 ml 2 × 1 ml a. 贮存于10 mM Tris-HCl pH 7.5,50 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100,50% 甘油。 b. 200 mM Tris-HCl pH 8.8,100 mM KCl,100 mM (NH4)2SO4,20 mM MgSO4,1% Triton X-100。 -20℃保存。  
价格:
¥
260.0
市场价
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货号:
P701-01/02
所属分类
Bst DNA聚合酶
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Bst DNA Polymerase Large Fragment

等温扩增用酶

具有较强的链置换活性

Bst DNA Polymerase Large Fragment 是 Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分, 具有5´→ 3´DNA聚合酶活性,以及较强的链置换 (strand displacement)活性,但缺失5´→ 3´核酸外切酶活性。Bst DNA Polymerase Large Fragment可用于等温扩增反应,例如LAMP (Loop-mediated isothermal amplification), RCA (Rolling-circle amplification)等。

组 分

P701- 01 800 U

P701- 02 8,000 U

Bst DNA Polymerase Large Fragment (8 U/μl)

100 μl

1 ml

10 × ThermoPol Buffer b

1 ml

3 × 1 ml

MgSO4 (100 mM)

1 ml

2 × 1 ml

a. 贮存于10 mM Tris-HCl pH 7.5,50 mM KCl,0.1 mM EDTA,1 mM DTT,0.1% Triton X-100,50% 甘油。

b. 200 mM Tris-HCl pH 8.8,100 mM KCl,100 mM (NH4)2SO4,20 mM MgSO4,1% Triton X-100。

-20℃保存。

 

关键词:
bst
mm
dna
ml
large
活性
polymerase
fragment
100
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Q1:重复性差

A1:使用荧光定量仪器检测;添加甜菜碱;引物可能有问题。

 

Q2:环介导等温扩增产物可以做酶切鉴定吗

A2:可以。但是开盖容易造成气溶胶污染,一定要谨慎操作。

 

Q3:LAMP无扩增

A3:建议多设计几组引物,通过预实验选出最佳引物;也可以在反应体系中添加甜菜碱,增强反应的特异性,但浓度过高会造成效率下降,需要摸索合适的浓度,建议25 μl体系中甜菜碱终浓度0.8 M。

 

Q4:加环引物出现假阳性,不加就正常,是什么原因

A4:若环引物经验证没有污染,则可能是环引物导致了非特异的扩增,这种情况下建议不使用环引物或者更换别的环引物。

 

Q5:环介导的等温扩增引物如何设计及筛选

A5:环介导的等温扩增引物的设计请参考http://primerexplorer.jp/e/,建议使用V5版本,具体操作手册登录下载。引物的初步筛选可参照操作手册,具体需要通过实验来验证最佳引物。

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