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HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

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    2022-07-28 15:06:11
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HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

15 min一步搞定基因组清除与反转录
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1683.0
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HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR

15 min一步搞定基因组清除与反转录

一步进行gDNA去除和第一链cDNA合成;qPCR

·  简便快捷的操作:基因组清除与逆转录一步完成

·  较高的cDNA 稳定性:敏型DNase,失活更彻底,cDNA长久保存更稳定

简便快捷的操作

基因组清除与逆转录一步完成,只需加入RNA 模板,15min 即可完成反应。

优异的逆转录效率

分别以Hela 细胞、小鼠肝脏、拟南芥叶片10 ng / 1 μg RNA 为模板,使用HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR (Vazyme # R333) 与市面常见All-in-one 产品(Supplier TG-H、TG-E、TI)、非All-in-one 产品(Supplier Vazyme #R323、TA)同时进行逆转录。将得到的 cDNA 进行qPCR定量分析。

 

从图中可以看出,在不同模板上,Vazyme #R333 的扩增CT 值较小,说明Vazyme #R333 的逆转录效率更优异。

较高的cDNA稳定性

使用HiScript III All-in-one RT SuperMix Perfect for qPCR (Vazyme #R333) 逆转100 ng HeLa 细胞RNA,将得到的cDNA 于37℃放置7 天、4℃放置4 周、冻融30 次进行测试,同时以-20℃存放cDNA 作为对照。将不同处理后的 cDNA 进行qPCR 定量分析。

 

从图中可以看出, cDNA 在各种条件下定量得到的△ CT 均在0.5 范围内(△CT 于±0.5 以内,认为两者差异可忽略不计),说明Vazyme #R333 逆转得到的cDNA 可于37℃存放7 天、4℃存放4 周、反复冻融30 次,cDNA 依然具有良好的稳定性。

本产品只需一步操作即可同时完成基因组清除与逆转录反应,操作简便、快捷,有效降低了加样过程造成的样品污染与RNA降解的风险。本产品包含HiScript® III Reverse Transcriptase、热敏型DNase以及针对基因组清除与逆转录一步反应优化的Buffer,延续了第三代逆转录产品高效率的特点;热敏型DNase生效快、效率高、易失活,cDNA可长久稳定保存。逆转录产物兼容染料法和探针法qPCR,可进行高性能的基因表达分析。

储存温度:-30 ~ -15℃,≤0℃运输。

 
关键词:
R333
第一链cDNA合成
逆转录
RT-qPCR预混液
cDNA第一链合成
反转录试剂
cDNA合成
RT-qPCR专用预混液
RT-PCR
R333-00
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:R333后续可以做PCR吗?

A1:若扩增的目的片段在4.5kb以内,可以使用R333进行逆转录,由于R333中添加了一定比例的随机引物,会产生更多的cDNA短片段,所以部分体系可能会出现非特异性扩增;若对特异性要求较高,推荐使用R312进行逆转录。

 

Q2:tsRNA如何进行逆转录反应?

A2:tsRNA是一类由tRNA衍生的非编码小RNA,通常长度为18 ~ 40 nt,在维持mRNA稳定性、调节翻译等过程中发挥重要作用。由于tsRNA长度过短,对其进行qPCR定量时,无法直接对tsRNA进行正、反向引物的设计(通常正向引物就足以覆盖tsRNA全长),因此可以使用增加逆转录产物长度的miRNA逆转录试剂盒来解决这一问题,miRNA的逆转录方法有两种,分别是茎环法和加尾法。Vazyme为您提供高特异性的茎环法逆转录产品MR101,及高通量的加尾法逆转录产品MR201均可对tsRNA进行逆转。

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