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Jurkat-NFAT Effector Cells

Jurkat-NFAT  Effector Cells  T Cell Activation Bioassay(NFAT) 操作简单 重复性好 Fc Effector Activity Bioassay                                                 图1A  图1B 以Raji作为靶细胞,Jurkat-NFAT-Luc作为效应细胞,建立可以反映Blinatumomab作用机制的T Cell Activation Bioassay (NFAT),检测原理和检测结果分别由图1A、图1B展示。 重复性、线性、精密性和准确性           图2A 图2B  表1 根据ICH指南,以Blinatumomab为检测抗体,Raji为靶细胞,对T Cell Activation Bioassay (NFAT)进行重复性(图1C),线性 (图1D),精密性和准确性(表1A)验证。  免疫治疗策略旨在诱导、加强或改进T细胞反应,已成为治疗肿瘤和自身免疫疾病的重要手段。通过激活TCR/CD3复合物以 及CD28受体的共刺激,T细胞被活化。这些受体在细胞表面的共同参与导致细胞内信号转导的产生以及核转录因子的激活, 如活化T细胞的核因子(NFAT)、NF-κB、AP-1。     TCR/CD3复合物被刺激后导致细胞内PLC-γ的磷酸化和活化,胞内钙流与NFAT通路的转录激活,从而使NFAT-RE介导的荧 光产生。基因工程改造的Jurkat-NFAT-Luc细胞是一种用于建立新型生物药的发现和开发的产品,它克服了现有测定法的局 限性,可用于新生物药的发现和开发,如双特异性抗体和CAR-T细胞疗法。 组 分 DD1302-01 Jurkat-NFAT Effector Cells 2 vials 长期保存:液氮或-140℃冰箱。 运输条件:干冰。  
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Jurkat-NFAT  Effector Cells 

T Cell Activation Bioassay(NFAT)

操作简单

重复性好

Fc Effector Activity Bioassay 

 

 

                                         


 图1A  图1B

以Raji作为靶细胞,Jurkat-NFAT-Luc作为效应细胞,建立可以反映Blinatumomab作用机制的T Cell Activation Bioassay (NFAT),检测原理和检测结果分别由图1A、图1B展示。

重复性、线性、精密性和准确性

         
图2A

图2B 

表1

根据ICH指南,以Blinatumomab为检测抗体,Raji为靶细胞,对T Cell Activation Bioassay (NFAT)进行重复性(图1C),线性 (图1D),精密性和准确性(表1A)验证。 

免疫治疗策略旨在诱导、加强或改进T细胞反应,已成为治疗肿瘤和自身免疫疾病的重要手段。通过激活TCR/CD3复合物以 及CD28受体的共刺激,T细胞被活化。这些受体在细胞表面的共同参与导致细胞内信号转导的产生以及核转录因子的激活, 如活化T细胞的核因子(NFAT)、NF-κB、AP-1。
    TCR/CD3复合物被刺激后导致细胞内PLC-γ的磷酸化和活化,胞内钙流与NFAT通路的转录激活,从而使NFAT-RE介导的荧 光产生。基因工程改造的Jurkat-NFAT-Luc细胞是一种用于建立新型生物药的发现和开发的产品,它克服了现有测定法的局 限性,可用于新生物药的发现和开发,如双特异性抗体和CAR-T细胞疗法。

组 分

DD1302-01

Jurkat-NFAT Effector Cells

2 vials

长期保存:液氮或-140℃冰箱。

运输条件:干冰。

 
关键词:
cells
细胞
nfat
bioassay
活化
cell
1a
重复性
effector
激活
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:Assay性能有波动
A1:如果靶细胞没有在一致的可控的条件下生长,那么assay测定的结果会有所不同。根据细胞培养指南,保证细胞的接种密度和培养体积是一致且准确的。同时,检测细胞倍增的时间。
Q2:较低的发光检测值(RLU读数)

A2:a)选择用于检测板发光的仪器。不建议使用主要设计用于荧光检测的一起仪器。光度计测量和报告的发光值是相对值,实际的RLU值会因检测仪器不同而变化。
b)每孔细胞数量不足会导致RLU变低。根据说明书处理细胞和进行铺板,保证每个孔中有足够数量的活细胞。
c)Bio-Lite试剂活性降低会导致RLU变低。按照说明书存储和使用Bio-Lite试剂。
Q3.较低的assay窗口(fold induction)

A3:a)优化测试样品的浓度范围,保证获得完整的剂量—效应曲线,包括完整的上下平台渐近线。
b)在3-24h范围内优化assay的孵育时间。
如果未经处理的对照的RLU值小于板中空白孔RLU值的10倍以上,则在计算窗口时,要使用减去空白孔背景值的对照RLU值。

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DD1302

Jurkat-NFAT Effector Cells

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