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  • cp

    Blood Direct PCR Kit V2-V21.1.pdf

    大小:
    2021-04-09 17:14:18
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浏览量:
2233

Blood Direct PCR Kit V2

高效扩增!无惧PCR抑制物的血液直扩PCR试剂盒
价格:
¥
600.0
市场价
600.0
浏览量:
2233
货号:
PD103-01/02
所属分类
直接扩增PCR
数量:
-
+
库存:
39996
*具体价格咨询当地业务员
暂时无货
1
产品详情
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说明书
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Blood Direct PCR Kit V2

高效扩增!无惧PCR抑制物的血液直扩PCR试剂盒

 

全血直扩PCR 试剂盒

·  基于改造的Phanta Blood Super-Fidelity DNA Polymerase,具有较强的扩增效率和PCR 抑制物耐受度

·  适用各种血液样本,兼容常规抗凝剂

·  可耐受高达40% 的全血模板

·  可从全血中高效扩增长达10 kb 的基因组片段

1. 广泛的物种兼容性

分别从人、大鼠、小鼠、猪、狗、兔、鸡、鸟、牛的-20℃存储的肝素抗凝全血中扩增237 bp的DNA片段。所有血样的血液模板使用浓度为10%。其中NTC:No Template Control;PC:Positive Control,使用纯化过的人基因组DNA 作为扩增模板。PCR 反应结束后进行PCR 电泳检测。以质粒为模板,primer pair 1和primer pair 2为引物,分别扩增两段大小均为690 bp,GC含量均为72%的片段。结果显示,只有加入PCR Enhancer的实验组才能扩增出如图所示的目的片段。

2. 优异的扩增性能

以人-20℃存储的肝素抗凝血为模板,扩增不同长度DNA片段。PCR结束后电泳显示,Blood Direct PCR Kit V2可以高效扩增长达7.5 kb的片段。

本产品可直接对全血样本(新鲜血液、4℃贮存血液、冷冻血液以及储存在Whatman903和FTA商用卡上的干血渍)进行PCR扩增,无需进行DNA纯化或样品预处理,且兼容所有常规抗凝剂(EDTA、柠檬酸盐、肝素等)。试剂盒中包含Phanta Blood Super-Fidelity DNA Polymerase对全血样品中的PCR抑制剂具有较强的抵抗力,可扩增全血浓度高达40%。配以精心优化的Buffer,本试剂盒能够从全血样品中高效扩增长达10 kb的基因组片段。试剂盒配有与哺乳动物和其他许多脊椎动物兼容的引物预混液Positive control primer mix,可用于进行阳性对照反应。

-20℃保存

关键词:
PD103
血液直扩PCR预混液
血液直扩PCR mix
血液直扩试剂
血液直接PCR
直接扩增PCR
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Q1:无扩增产物或者产物量很少

A1:(1) 核对引物设计,确认引物的纯度和浓度;

(2) 重复实验,确认反应体系配制、反应程序设置无误;

(3) 增加循环数;

(4) 提高Mg2+ 浓度;

(5) 优化退火温度;

(6) 尝试不同的血液用量。

 

Q2:产物呈现高分子量弥散条带。

A2:(1) 扩增样品电泳检测前离心取上清;

(2) 延伸时间不应超过60 sec/kb;

(3) 优化退火温度;

(4) 尝试不同的血液用量;

(5) 减少总循环数;

(6) 降低引物浓度。

 

Q3: 产物呈现低分子量分散带。

A3:(1) 扩增样品电泳检测前离心取上清;

(2) 提高退火温度;

(3) 尝试不同的血液用量;

(4) 降低引物浓度;

(5) 减少总循环数;

(6) 重新设计引物。

 

Q4: 全血扩增引物设计注意事项。

A4:(1) 引物3’端最后一个碱基选择C或G;

(2) 引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配;

(3) 引物3’端尽量避免出现发夹结构;

(4) 引物Tm值控制在60℃-72℃之间(推荐使用软件Primer Premier 5进行计算);

(5) 引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;

(6) 引物GC含量控制在40%-60%之间;

(7) 正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。

 

Q5:PD103血液直扩试剂盒样本能否用于病毒或者细胞的直扩

A5:没有相关测试数据,直扩细胞可以使用Phanta max系列产品。

 

这是描述信息
DL5000 DNA Marker
60.00
60.00
DL 15000 DNA Marker
75.00
75.00
RNase-free ddH₂O
50.00
50.00
Ultra GelRed (10,000 ×)
700.00
700.00
1 × TAE 速溶颗粒
350.00
350.00
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品牌故事  Phanta | ClonExpress | Mut Express microRNA

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