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细胞凋亡检测

细胞凋亡检测
1200.00
货  号:
A213-01/02
Annexin V-PE/7-AAD Apoptosis Detection Kit  染色特异性强 PE染料为红色荧光,可与绿色荧光实现共染 图1. Annexin V-PE/7-AAD染色检测凋亡效果图   图 A. 未经喜树碱诱导的Jurkat 细胞,用Annexin V-PE 和7-AAD双染后流式二维图(左)与直方图(右); 图 B. 用终浓度为4 μM 的喜树碱诱导Jurkat 细胞凋亡4 h,用Annexin V-PE 和7-AAD双染后流式二维图(左)以及直方图(右)。 图2. Annexin V-PE/7-AAD染色检测不同程度凋亡   用喜树碱(Camptothecin,CPT)诱导Jurkat细胞(人T淋巴瘤细胞)凋亡,诱导浓度分别为0、4、8、12、16μM,分别诱导4小时后,参照产品说明书实验方案进行染色,用流式细胞仪检测结果如图2。 (A)0μM. (B)4μM.(C)8μM.(D)12μM.(E)16μM.(F)竞争封闭实验,采用16μM CPT诱导Jurkat细胞4小时后,参照说明书收集并洗涤细胞,于染色前加入无染料标记的Annexin V蛋白孵育10分钟,再进行Annexin V-PE/7-AAD染色。无染料标记的Annexin V结合了细胞上的PS,再进行染色时,Annexin V-PE无法结合PS,这说明了染色的特异性。 在正常细胞中,磷酯酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的PS由内侧外翻至外侧,从而将PS暴露于细胞外部环境。Annexin V是一种35 - 36 kDa的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与PS具有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞的细胞膜结合。因此Annexin V被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。   将Annexin V以藻红蛋白(Phycoerythrin, PE)进行标记,标记后的Annexin V保留了与PS的高亲和力,可作为探针,利用流式细胞仪进行细胞凋亡的检测。由于在凋亡早期即发生PS外翻,故Annexin V-PE染色在凋亡早期就能识别出凋亡的发生。7-氨基放线菌素(7-AAD)是一种核酸染料,7-AAD不能透过正常细胞或早期凋亡细胞完整的细胞膜,但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜并与其内的DNA结合,可用来区分早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞或坏死细胞。因此将Annexin V-PE与7-AAD进行共染,就可以区分不同凋亡时期的细胞。 本试剂盒所有组分均在2 - 8℃保存,Annexin V-PE和7-AAD Staining Solution需避光保存,勿冷冻。
1200.00
货  号:
A213-01/02
浏览量:
2927
关键字:
7-aad
细胞
凋亡
annexin
v-pe
ps
染色
早期
诱导
1000.00
货  号:
A211-01/02
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit 早期凋亡检测 绿色荧光标记 试剂盒中含有PI,可与Annexin V -FITC配合区分凋亡/ 坏死细胞 适用于流式细胞仪和荧光显微镜 图 A. 未经喜树碱诱导的Jurkat 细胞,用Annexin V-FITC 和碘化丙啶(PI) 双染后流式二维图(左)与直方图(右); 图 B. 用终浓度为4 μM 的喜树碱诱导Jurkat 细胞凋亡4 h,用Annexin V-FITC 和碘化丙啶(PI) 双染后流式二维图(左)以及直方图(右)。 在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS) 只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS) 由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35-36 kDa 的Ca2+ 依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,因此Annexin V 被公认为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。 将Annexin V 进行绿色荧光(FITC) 标记,以标记了的Annexin V 作为探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI) 是一种核酸染料,它不能透过正常细胞或早期凋亡细胞完整的细胞膜,但对凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将  Annexin V 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。 4-8℃保存,长期不用可将Annexin V-FITC保存在-20℃
1000.00
货  号:
A211-01/02
浏览量:
6540
关键字:
早期凋亡检测
Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
A211-01/02
绿色荧光标记
1780.00
货  号:
A113-01/02/03
TUNELBrightRedApoptosisDetectionKit更亮、更稳定的红色荧光Bright因子,使得荧光更亮,抗淬灭能力更强标记红色荧光,便于与GFP等其它绿色荧光共标记高活性的重组TdT酶保证荧光掺入效率适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片图1.人肝细胞WRL-68阳性处理后产生的凋亡。A.TUNELBrightRed染色,箭头所指为凋亡细胞。B.Merge,蓝色为DAPI标记
1780.00
货  号:
A113-01/02/03
浏览量:
3475
关键字:
TUNEL BrightRed Apoptosis Detection Kit
标记红色荧光
细胞凋亡检测
1780.00
货  号:
A112-01/02/03
TUNELBrightGreenApoptosisDetectionKit更亮、更稳定的绿色荧光的Bright因子,使得荧光更亮,抗淬灭能力更强高活性的重组TdT酶保证荧光掺入效率适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片
1780.00
货  号:
A112-01/02/03
浏览量:
3457
关键字:
TUNEL BrightGreen Apoptosis Detection Kit
A112-01/02/03
细胞凋亡检测
绿色荧光
1580.00
货  号:
A111-01/02/03
TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit 绿色荧光检测凋亡 经过优化FITC-12-dUTP 与未标记dNTP 的比例,提高了荧光检测的信噪比和灵敏度 高活性的重组TdT 酶保证荧光掺入效率 适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片 图1. 果蝇三龄幼虫视盘(eye disc) 凋亡诱导基因Hid 在特异性启动子驱动下在果蝇视盘的远端诱导出大量凋亡细胞。A. TUNEL 染色,标记凋亡细胞。B. ELAV 染色,标记所有的感光细胞。C. Merge 图2. 人睾丸组织切片经DNase I 处理 A. TUNEL染色,标记凋亡细胞。B. PI染色,标记所有细胞核。C. Merge。 细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体的DNA 被内源核酸内切酶有规律的降解成长度约为180 bp-200 bp 的整倍数的片段。本试剂盒采用TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 法,应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT) 在凋亡细胞断裂的DNA的3’- 羟基(3’-OH) 末端催化掺入荧光素-12-脱氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP 标记的DNA 可以用荧光显微镜直接观察或者用流式细胞仪定量。试剂盒对标记反应进行了优化,采用一定比例的FITC-12-dUTP 和未标记dNTP 进行3’-OH 末端的核苷酸掺入,使得同一个断裂的DNA 片段末端可以形成更长的“标记尾巴”。该“标记尾巴”减少了相邻掺入dNTP 上标记基团的空间位阻,增加每个断裂片段上的荧光基团数目,降低荧光基团相邻后可能造成的聚集和淬灭,从而提高检测灵敏度,减少非特异性反应。   经过优化FITC-12-dUTP 与未标记dNTP 的比例,提高了荧光检测的信噪比和灵敏度,高活性的重组TdT 酶保证荧光掺入效率,适用于细胞爬片、石蜡切片和冰冻切片。 -30 ~ -15℃保存; FITC-12-dUTP Labeling Mix,-30 ~ -15℃避光保存。
1580.00
货  号:
A111-01/02/03
浏览量:
3291
关键字:
TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit
绿色荧光检测凋亡
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