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2 × Phanta Flash Master Mix

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P510（单页）V23.1.pdf

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2023-04-28 11:18:01

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2 × Phanta Flash Master Mix

1 h轻松扩增10 kb以内片段，让您的实验更高效！

价格：

615.0

市场价

元

615.0

浏览量:

1000

货号：

P510-01/02/03

所属分类

高保真PCR

数量：

库存:

8986

*具体价格咨询当地业务员

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产品详情

FAQ

组分

说明书

相关文献

2 × Phanta Flash Master Mix

1 h轻松扩增10 kb以内片段，让您的实验更高效！

分子克隆；基因鉴定；高AT/GC体系

快速扩增：1h即可完成10kb以内片段的扩增
保真度高：保真度是 Taq DNA Polymerase 的81倍
高成功率：轻松扩出目的条带
适应性广：GC含量兼容范围24-83%，兼容粗品和样本直扩
操作便捷： 加入引物和模板即可进行扩增，减少实验操作的步骤

1.快速扩增

使用2 × Phanta Flash Master Mix（Vazyme #P510，简称P510）和2 × Phanta Flash Master Mix (Dye Plus)（Vazyme #P520，简称P520）以及（TB1、TB2），采用1 sec/kb的延伸速度扩增353 bp、873 bp的目的片段，采用4 sec/kb和5 sec/kb的延伸速度扩增7,140 bp的目的片段。结果显示，P510和P520均可成功扩增。

2.高保真度

采用二代测序方法（P. Mielinis. et al. Journal of Molecular Biology (2021)），测定不同聚合酶的扩增保真度。结果显示，Phanta Flash Super-Fidelity DNA Polymerase保真度是Taq DNA Polymerase的81倍。

3.高特异性

使用P510、P520和市售其他品牌高保真酶，按照各自说明书推荐体系和程序扩增不同长度片段，结果显示，P510和P520与其他品牌高保真酶相比，扩增特异性更高。

本产品延伸快速（≤1 kb片段，1 sec/kb；≤10 kb片段，4 - 5 sec/kb；>10 kb片段，10 sec/kb），保真度是Taq酶的81倍。通过缓冲优化，扩增特异性与模板适应性进一步提高。使用方便，只需加入模板和引物即可进行扩增。

-30 ~ -15℃保存

关键词:

P510

高保真PCR mix

高保真PCR预混液

快速高保真酶mix

高保真mix

flash mix

快速高保真酶预混液

快速高保真酶

高保真PCR

快速高保真PCR

Phanta高保真mix

菌落PCR

Q1：扩增效率低，实验组无扩增条带。

A1：(1) 引物

检查人工合成的引物是否因存储条件不当而降解；引物设计是否合理，可利用BLAST检查引物特异性或重新设计引物。

(2) 模板

长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；模板GC含量过高会导致DNA的双链无法打开，此时加入PCR Enhancer（货号P021），可以有效降低解链温度；模板为粗品，存在抑制物，建议降低模板浓度（稀释使用；若样本为植物叶片，要确保植物为非多糖多酚植物，取新鲜幼嫩的叶片，并将叶片面积剪小，如黄枪头尖部面积大小）；若模板为cDNA，要确认逆转录所用RNA的纯度及完整度。

(3) 酶

反应所用的酶失活，建议更换新酶或用另一来源的酶重新实验。

(4) 扩增体系

反应体系配制错误，建议重复实验。

(5) 反应程序

检查变性温度是否准确，PCR仪指示温度与实际温度是否相符，如果温度过高，酶在前几个循环就迅速失活，温度过低则模板变性不彻底；若模板为酵母菌，可将预变性时间延长10min；退火温度不合适，可对退火温度设置梯度，摸索合适的退火温度；如果目的片段较长，可尝试Touch Down 程序；检查延伸时间是否充足。

Q2：扩增的条带亮度不太亮。

A2：(1) 引物

检查人工合成的引物是否降解。

(2) 模板

首先确认模板的质量，长期放置、反复冻融会导致模板断裂、开环或降解，应使用新鲜制备的DNA双链作为模板；如果模板没有了，可用首次扩增产物按倍比稀释后作为模板进行二次扩增。

(3) 反应程序

可尝试使用Touch Down程序；延长延伸时间，提高循环数。

Q3：扩增特异性差，非特异性扩增。

A3：(1) 引物

引物设计不够优化。引物与靶序列有非特异性互补或自身聚合成二聚体，可降低引物浓度进行优化，必要时重新设计引物。

(2) 模板

模板不纯，被污染，需重新制备模板。