
Vaccinia Capping System
真核生物中,mRNA经转录后修饰在5'端形成一个特殊的帽子结构(m7Gppp5'N),此结构与mRNA的稳定性、转运(出核)和翻译紧密相关。通过酶促反应为RNA加帽是一种简单有效的方法,能够显著改善体外转录的用于转染和显微注射的RNA的稳定性和翻译能力。牛痘病毒加帽酶(Vaccinia Capping Enzyme)由两个亚基(D1,D12)组成,兼具RNA三磷酸酯酶活性、鸟苷酰基转移酶活性和鸟嘌呤甲基转移酶活性,它们对于添加一个完全的Cap0结构都是必须的。在合适浓度的S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosylmethionine,SAM),鸟苷三磷酸(GTP)等条件存在下,牛痘病毒加帽酶能够将帽子结构(m7Gppp,Cap0)加到RNA5'端。基于本酶促反应,加帽效率可接近100%,并且保证帽子结构
方向正确。
本制品Vaccinia Capping System包含牛痘病毒加帽酶和其他加帽反应所需组分,可用于T7 RNA Polymerase (Vazyme #DD4101)催化的体外转录反应产生的RNA的加帽反应。
组 分 |
DD4109-01 (1.5 KU) |
DD4109-02 (10 KU) |
Vaccinia Capping Enzyme (10 U/μl) |
150 μl |
1 ml |
10 x Capping Buffer |
300 μl |
2 × 1 ml |
GTP (10 mM) |
150 μl |
1 ml |
SAM (32 mM) |
30 μl |
200 μl |
RNase-free ddH2O |
3 ml |
20 ml |
50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.1% Triton X-100 and 50% Glycerol (25℃, pH 8.0).
-30 ~ -15℃储存,运输条件:≤0℃。

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