搜索
搜索

科技成就健康生活

 

产品

科学研究试剂

高通量测序文库构建试剂

药物研发试剂

分子诊断试剂

动物疫病诊断

产品分类
  • pdf

    T7 High Yield RNA Transcription Kit..-V21.1.pdf

    大小:
    2021-11-01 14:20:28
1/1
浏览量:
1000

T7 High Yield RNA Transcription Kit

零售价
¥
0.0
市场价
0.0
浏览量:
1000
产品编号
DD4201
数量
-
+
库存:
199998
1
产品详情
FAQ
组分
说明书

T7 High Yield RNA Transcription Kit进行了转录反应体系的优化,使用户能够通过体外转录反应高效地获得大量RNA产物。试剂盒使用T7 RNA聚合酶,以含有T7启动子序列的线性双链DNA为模板,NTPs为底物对启动子下游DNA序列进行转录,获得单链RNA。本试剂盒也能够以修饰核苷为底物产生染料、生物素或者放射性标记的RNA;以帽子结构或者帽子类似结构为底物产生加帽的RNA。

本试剂盒一个反应(20 μl体系)能够获得150 - 200 μg RNA产物,并可放大用于产生毫克级别RNA。转录合成的RNA可用于如RNA结构与功能研究、RNA酶保护、探针杂交、RNAi等应用,也可通过牛痘病毒加帽系统(Vazyme #DD4109)和2'-O-Methyltransferase(Vazyme #DD4110)加帽,E.coli Poly(A)Polymerase(Vazyme #DD4111)加尾产生mRNA,用于体外翻译、转染、显微注射或其他下游应用。

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:转录产物产量低
A1:模板与产量密切相关,实验组产量明显低于对照组,可能原因:①实验模板中有抑制反应的成分;②实验模板本身原因。建议a. 重新纯化模板;b. 确定模板定量以及完整性;c. 延长37℃反应时间;d. 加大模板投入量;e. 尝试其他的启动子和RNA聚合酶。


Q2:短片段转录产物产量
A2:转录起始片段短会抑制反应,转录产物小于0.3 kb时,延长反应时间或增加模板量可以提高RNA产量。16 h过夜反应或者使用2 μg模板可以使RNA产量最大化。


Q3:产物电泳拖尾现象
A3:电泳过程中有拖尾现象,可能原因:

①实验操作过程被RNase污染;

②DNA模板被RNase污染。体系中的RNase抑制剂只能抑制痕量的RNase残留,建议重新纯化模板DNA,并在实验过程中使用RNase-Free的枪头和EP管,佩戴一次性乳胶手套和口罩,所有试剂均用RNase-Free ddH2O配制。


Q4:RNA产物片段大于预期
A4:如果电泳显示产物条带大于预期,可能原因:①质粒模板可能没有完全线性化;②线性化模板有义链3'末端突出;③RNA存在未完全变性的二级结构。建议确认模板结构,并通过变性电泳的方式确认实验结果。


Q5:RNA产物片段小于预期
A5:如果电泳显示产物条带小于预期,可能原因:①模板序列中包含类似T7 RNA聚合酶终止序列;②模板GC含量高形成高级结构;③RNase污染。不同的聚合酶识别不同的终止序列,若模板中含终止序列,建议尝试不同的RNA聚合酶;如果模板GC含量较高,建议加入SSB蛋白以提高转录效率。
 

上一个
下一个
这是描述信息
暂时没有内容信息显示
请先在网站后台添加数据记录。

售后服务   服务流程   |   订购流程   |  真伪查询

邮  箱  sales@vazyme.com (销售咨询)
support@vazyme.com (技术支持)
marketing@vazyme.com (市场推广)

举报电话  025-83700665

举报邮箱   jubao@vazyme.com

微信公众号

扫码关注

 地 址:江苏省南京经济技术开发区科创路红枫科技园C2栋   电话:400-600-9335  网站建设: 中企动力 南京

搜索
搜索