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    DD4301-UniversalBenzo Nuclease-V21.1.pdf

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    2021-11-26 17:56:21
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UniversalBenzo Nuclease

UniversalBenzo Nuclease 严格的生产条件:GMP环境下制备 高效、便捷:在广泛的条件下高效的降解所有形式的RNA和DNA 宽广的应用场景:去除疫苗与重组蛋白等生物制品生产过程中的外源性核酸,提高产品的生物安全性去除病毒颗粒表面缠绕的核酸,利于病毒颗粒的释放和纯化降解细胞裂解液中的核酸,降低液体粘度,提高重组蛋白产量处理用于ELISA、电泳等分析,或柱层析纯化的样品,提高分辨率和回收率 消化不同类型核酸 图1 在20μl体系中,37℃,30 min条件下,分别投入不同类型的核酸样本各1 μg,通过琼脂糖凝胶电泳检测可知,1 U UniversalBenzo Nuclease (250/μl)对不同类型的核酸消化效果均较好。   反应温度 图2 UniversalBenzo Nuclease的适合反应温度是37℃   PH条件   图3 UniversalBenzo Nuclease在pH值在8-10之间均能保 持较高的活性   Na+、K+对酶活的影响   图4 Na+ 和K+ 对UniversalBenzo Nuclease活性的抑制性较强,在Na+和K+浓度达到300 mM时,酶活基本全部丧失; Na+和K+对酶的抑制作用具有一致的趋势,推测所有其他一价阳离子都有类似的效果 Mg2+、Mn2+对酶活的影响   图5 1-2 mM Mg2+或Mn2+的浓度对维持UniversalBenzo Nuclease的活性是必不可少,Mg2+是必须的,因为它能使酶达到较好的活性水平;  2-10 mM的Mg2+或Mn2+对UniversalBenzo Nuclease活性无抑制   β-ME对酶活的影响 图6 β-ME对UniversalBenzo Nuclease活性没有影响   PO43-对酶活的影响   图7 0-10 mM PO43-对UniversalBenzo Nuclease活性有一些抑制,但在浓度超过80 mM时对活性抑制较为明显   Trition X-100、Tween-20对酶活的影响 图8 通过将测试物质加入标准活性测定的反应缓冲液中,评价Trition X-100、Tween-20对UniversalBenzo Nuclease活性的影响;  当Trition X-100、Tween-20的浓度低于1%时,对UniversalBenzo Nuclease的活性无显著影响   EDTA对酶活的影响 图9 EDTA浓度为1 mM时,对UniversalBenzo Nuclease的活性有部分抑制作用;当EDTA浓度超过2 mM几乎完全抑制了UniversalBenzo Nuclease的活性 本制品UniversalBenzo Nuclease,是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶,并经过基因工程改造。本酶可降解双链、单链、环状和线性的RNA和DNA,将核酸完全消化成3- 5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。本酶可在广泛的条件下高效的降 解所有形式的RNA和DNA,因此被广泛用于去除生物制品中的核酸。 本品利用大肠杆菌(E. coli)大规模发酵表达纯化,在GMP环境下制备,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋 白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒载体纯化、灭活等各类疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业中作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别。 组 分 DD4301-PC-01 (100 KU) DD4301- PC-02 (250 KU) DD4301- PC-03 (1.25 MU) DD4301-PC-04(5 MU) UniversalBenzo Nuclease 400 μl 1 ml 5 ml 20 ml -30 ~ -15℃保存,不建议长期2 ~ 8℃储存,如需要,建议无菌过滤。 有效期3年,避免反复冻融。  -30 ~ -15℃运输。  
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产品编号
DD4301-PC- 01/02/03/04
所属分类
全能核酸酶
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-
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库存:
119988
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组分
说明书

UniversalBenzo Nuclease

严格的生产条件:GMP环境下制备

高效、便捷:在广泛的条件下高效的降解所有形式的RNA和DNA

宽广的应用场景:去除疫苗与重组蛋白等生物制品生产过程中的外源性核酸,提高产品的生物安全性去除病毒颗粒表面缠绕的核酸,利于病毒颗粒的释放和纯化降解细胞裂解液中的核酸,降低液体粘度,提高重组蛋白产量处理用于ELISA、电泳等分析,或柱层析纯化的样品,提高分辨率和回收率

消化不同类型核酸

图1

在20μl体系中,37℃,30 min条件下,分别投入不同类型的核酸样本各1 μg,通过琼脂糖凝胶电泳检测可知,1 U UniversalBenzo Nuclease (250/μl)对不同类型的核酸消化效果均较好。
 

反应温度

图2

UniversalBenzo Nuclease的适合反应温度是37℃

 

PH条件

 

图3

UniversalBenzo Nuclease在pH值在8-10之间均能保 持较高的活性

 

Na+、K+对酶活的影响

 

图4

Na+ 和K+ 对UniversalBenzo Nuclease活性的抑制性较强,在Na+和K+浓度达到300 mM时,酶活基本全部丧失;

Na+和K+对酶的抑制作用具有一致的趋势,推测所有其他一价阳离子都有类似的效果


Mg2+、Mn2+对酶活的影响

 

图5

1-2 mM Mg2+或Mn2+的浓度对维持UniversalBenzo Nuclease的活性是必不可少,Mg2+是必须的,因为它能使酶达到较好的活性水平; 
2-10 mM的Mg2+或Mn2+对UniversalBenzo Nuclease活性无抑制

 

β-ME对酶活的影响

图6

β-ME对UniversalBenzo Nuclease活性没有影响

 

PO43-对酶活的影响

 

图7

0-10 mM PO43-对UniversalBenzo Nuclease活性有一些抑制,但在浓度超过80 mM时对活性抑制较为明显

 

Trition X-100、Tween-20对酶活的影响

图8

通过将测试物质加入标准活性测定的反应缓冲液中,评价Trition X-100、Tween-20对UniversalBenzo Nuclease活性的影响; 
当Trition X-100、Tween-20的浓度低于1%时,对UniversalBenzo Nuclease的活性无显著影响

 

EDTA对酶活的影响

图9

EDTA浓度为1 mM时,对UniversalBenzo Nuclease的活性有部分抑制作用;当EDTA浓度超过2 mM几乎完全抑制了UniversalBenzo Nuclease的活性

本制品UniversalBenzo Nuclease,是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶,并经过基因工程改造。本酶可降解双链、单链、环状和线性的RNA和DNA,将核酸完全消化成3- 5个碱基长度的5’-单磷酸寡核苷酸。本酶可在广泛的条件下高效的降 解所有形式的RNA和DNA,因此被广泛用于去除生物制品中的核酸。 本品利用大肠杆菌(E. coli)大规模发酵表达纯化,在GMP环境下制备,不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度,提高蛋 白纯化效率及功能研究;还可以应用在病毒载体纯化、灭活等各类疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业中作为宿主残留核酸去除试剂,将宿主残留核酸降至皮克(pg)级别。

组 分
DD4301-PC-01 (100 KU)
DD4301- PC-02 (250 KU)
DD4301- PC-03 (1.25 MU)
DD4301-PC-04(5 MU)
UniversalBenzo Nuclease
400 μl
1 ml
5 ml
20 ml

-30 ~ -15℃保存,不建议长期2 ~ 8℃储存,如需要,建议无菌过滤。
有效期3年,避免反复冻融。 
-30 ~ -15℃运输。

 

关键词:
universalbenzo
nuclease
活性
核酸
影响
mm
浓度
纯化
抑制
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Q:UniversalBenzo Nuclease的抑制条件:

A:本产品可被一定的盐浓度抑制活性,以抑制50%左右活性为例,>100 mM的一价阳离子(如 Na+、 K+等),>10 mM的二价Ca2+离子, >100 mM 的盐酸胍(guanidine HCl),> 20 mM 的磷酸盐(phosphate),> 25 mM 的硫酸铵(ammonium sulfate)等。 此外,螯合剂也可通过螯合体系中的 Mg2+以达到抑制酶活的作用, 通过加入更多的 Mg2+可恢复 BenzoNuclease 的活性(1mM 的 EDTA 可部分抑制 BenzoNuclease 活性, 5mM 的 EDTA 可使其活性丧失约 90%。 1-2 mM Mg2+离子对于此酶活性至关重要。

组 分
DD4301-PC-01 (100 KU)
DD4301- PC-02 (250 KU)
DD4301- PC-03 (1.25 MU)
DD4301-PC-04(5 MU)
UniversalBenzo Nuclease
400 μl
1 ml
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