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BCA Protein Quantification Kit

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    BCA Protein Quantification Kit-V22.1.pdf

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    2022-03-30 14:06:27
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BCA Protein Quantification Kit

BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Quantification Kit),是目前灵敏度较高的蛋白质测定方法之一。在碱性条件下,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,Cu+ 与独特的BCA Reagent A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应,形成紫色的络合物。该水溶性的复合物在A562 nm 处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白质浓度在广泛范围内有良好的线性关系,根据吸光值可以推算出蛋白浓度。因此,使用酶标仪测定其在A562 nm 处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。 常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween-20等不影响检测结果, 但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可使用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。
价格:
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280.0
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货号:
E112-01/02
所属分类
BCA蛋白定量
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BCA Protein Quantification Kit

准确、快速的蛋白定量试剂

灵敏型蛋白质浓度定量

作简单          

高灵敏度

兼容性广                

线性关系高的标准曲线

图1.使用BSA标准蛋白绘制标准曲线

BCA 蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Quantification Kit),是目前灵敏度较高的蛋白质测定方法之一。在碱性条件下,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,Cu+ 与独特的BCA Reagent A(含有BCA)相互作用产生敏感的颜色反应,形成紫色的络合物。该水溶性的复合物在A562 nm 处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白质浓度在广泛范围内有良好的线性关系,根据吸光值可以推算出蛋白浓度。因此,使用酶标仪测定其在A562 nm 处的吸收值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。

 

常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween-20等不影响检测结果, 但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高,可使用Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。

BCA Reagent A/B,15 ~ 25℃,室温运输。

BSA Standard,-30 ~ -15℃,≤0℃运输。

关键词:
bca
蛋白
浓度
标准
测定
曲线
蛋白质
使用
protein
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

Q1:样本浓度不在标曲范围内,该怎么操作?

A1:如果样本浓度太高,需要预先做稀释,最好是通过预实验确定样本稀释范围。

 

Q2:标曲R2不符合要求是什么原因?

A2:主要是加样量不准确导致的误差,建议校正排枪,注意加样准确度。另外在进行分析时,可以去掉1-2个偏差较大的点,重新计算标曲。

 

Q3:BCA使用注意事项。

A3:(1)需96孔酶标板,酶标仪一台,测定波长为A562 nm最佳。也可以使用分光光度计测定,但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大BCA工作液的使用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时, 每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少;

(2)长期不用时,Reagent A/B可置于2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。Reagent A试剂在低温条件下出现结晶沉淀时,可37℃孵育使 其完全溶解, 不影响使用; 

(3)如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请使用诺唯赞生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒; 

(4)进行BSA标准蛋白标准曲线绘制时,使用样品蛋白的溶解液溶解BSA最优; 

(5)BCA试剂对去污剂不敏感,可兼容SDS 3%、Tween-20 5%、EDTA 15 mM、无EGTA、Triton X-100 5%;对还原剂比较敏感,可兼容 DTT 0.5 mM、β-巯基乙醇 0.07%; 

(6)BCA工作液配制过程中吸取Reagent A液和Reagent B液务必更换吸头,工作液新鲜配制后应立即使用,长时间放置会影响检测灵敏度;

(7)最好使用塑料比色皿,如使用玻璃比色皿或石英比色皿,使用后立即用少量95%的乙醇清洗。

(8)为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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