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Detergent Compatible Bradford Protein Quantification Kit

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    Detergent Compatible Bradford Protein...-V21.1.pdf

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    2021-07-09 14:30:36
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Detergent Compatible Bradford Protein Quantification Kit

通用型蛋白浓度定量
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E211-01
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Detergent Compatible Bradford Protein Quantification Kit

通用型蛋白定量试剂

通用型蛋白浓度定量

检测蛋白的灵敏度高,操作简便

线性关系好

对去垢剂有较强的耐受性,可兼容很高浓度的去垢剂

稳定性好,BSA标准蛋白更纯

图1. 使用BSA标准蛋白绘制标准曲线

Bradford 法( 考马斯亮蓝法),是目前灵敏度较高的蛋白质浓度测定方法之一。当Bradford 染色液( 考马斯亮蓝G250) 和蛋白在酸性条件下结合时,溶液颜色由棕黑色转为蓝色,吸光值波长由456 nm 转为595 nm,吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系。通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值,推算出蛋白浓度,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。

本试剂通过研发升级,对蛋白提取中常见的去垢剂有较高的耐受性。本试剂盒和常规的Bradford 蛋白浓度测定试剂盒相比,可以兼容一系列常见的去垢剂,克服了Bradford 法对去垢剂敏感的缺点;和BCA法相比,能够兼容高浓度的还原剂,并且检测速度快,在检测含去垢剂样品蛋白浓度时,更加快捷。

Bradford Reagent 2℃ ~8℃保存

BSA Standard -30℃ ~-15℃保存

关键词:
E211
蛋白定量;Bradford法蛋白定量;考马斯亮蓝;Bradford;蛋白质浓度测定;Bradford法蛋白质浓度测定;Western Blot;蛋白分析;WB;蛋白浓度测定
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Q1:样本浓度不在标曲范围内,该怎么操作?

A1:如果样本浓度太高,需要预先做稀释,最好是通过预实验确定样本稀释范围。

 

Q2:标曲R2不符合要求是什么原因?

A2:主要是加样量不准确导致的误差,建议校正排枪,注意加样准确度。另外在进行分析时,可以去掉1-2个偏差较大的点,重新计算标曲。

 

Q3:Bradford使用注意事项。

A3:(1)Bradford法对去污剂敏感,受高浓度去垢剂影响。需确保SDS浓度低于0.1%,Triton X-100低于0.2%,Tween-20低于0.1%,NP-40低于 0.1%。含去垢剂的样品推荐使用BCA蛋白浓度测定试剂盒 (Vazyme # E112)和Bradford耐去垢剂型蛋白浓度测定试剂盒(Vazyme # E211); 

(2)染色液使用前请混匀;

(3)将染色液放置到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度; 

(4)由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定程度后,颜色反应并不成线性增加,因此标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应 按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度;

(5)反应在5分钟后显色充分,在10分钟后可能开始出现沉淀。故建议在加入染色液后5-10分钟内完成检测,误差较小; 

(6)推荐使用塑料比色皿。如使用玻璃比色皿或石英比色皿,使用后立即用少量95%的乙醇清洗。

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