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    2022-03-02 17:23:51
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EGFP mRNA(N¹-Me-Pseudo UTP)

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¥
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产品编号
DD4501-01/02
所属分类
储备的mRNA
数量
-
+
库存:
1998
1
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组分
说明书

EGFP mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)

EGFP mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)经细胞转染后可表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP),该蛋白最初从水母(Aequorea victoria)中分离,最大发射波长为509 nm,激发的绿色荧光可以通过荧光显微镜或流式细胞术轻松检测。EGFP mRNA作为报告mRNA,是监测和优化转染效率的理想选择,可以作为mRNA转染的阳性对照。

 

本mRNA使用T7 RNA聚合酶,以含有T7启动子序列的线性双链DNA为模板,NTPs为底物,所有UTP均替换为N1-Me-Pseudo UTP,对启动子下游DNA序列进行转录,获得单链RNA(T7 High Yield RNA Transcription Kit(N1-Me-Pseudo UTP) Vazyme #DD4202)。通过Vaccinia Capping System(Vazyme #DD4109)和mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase (Vazyme #DD4110)进行酶法加帽得到高加帽率的Cap 1结构。相比于Cap 0结构,具有Cap 1结构的mRNA对于哺乳动物系统更适合,且使用N1-Me-Pseudo UTP修饰,可提供更高的翻译效率并抑制mRNA介导的先天免疫激活。

利用TransIT-mRNA (MIRUS #MIR2250)转染试剂,将1 μg EGFP mRNA转染至HEK 293T细胞中,转染20 h后通过荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效率,转染效率85%以上。

HEK293T细胞转染20 h后,EGFP mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)表达荧光效果图及流式图

 

HEK293T细胞转染20h后,竞品EGFP mRNA表达荧光效果图及流式图

 

EGFP mRNA在25˚C储存4天,在4˚C和-20˚C储存14天,对纯度没有显著影响

 

EGFP mRNA反复冻融30次,对纯度没有显著影响

产品

EGFP mRNA(N1-Me-Pseudo)

DD4501

mRNA长度

985个核苷酸

浓度

1mg/mL

储存buffer

RNase-free H2O

-85 ~ -65℃保存,干冰运输

未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

产品

EGFP mRNA(N1-Me-Pseudo)

DD4501

mRNA长度

985个核苷酸

浓度

1mg/mL

储存buffer

RNase-free H2O

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