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Firefly Luciferase mRNA(N¹-Me-Pseudo UTP)

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Firefly Luciferase mRNA(N¹-Me-Pseudo UTP)

Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP) Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)进入细胞后会表达萤火虫荧光素酶蛋白,该酶ATP依赖性地催化D-荧光素氧化,在560nm波长处产生荧光。Firefly Luciferase最初从萤火虫Photinus pyralis中提取,通常用作基因调控和功能研究的生物发光报告基因,适用于mRNA递送、翻译效率、细胞活力和体内成像等实验。   本mRNA使用T7 RNA聚合酶,以含有T7启动子序列的线性双链DNA为模板,NTPs为底物,所有UTP均替换为N1-Me-Pseudo UTP,对启动子下游DNA序列进行转录,获得单链RNA(T7 High Yield RNA Transcription Kit(N1-Me-Pseudo UTP) Vazyme #DD4202)。通过Vaccinia Capping System(Vazyme #DD4109)和mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase (Vazyme #DD4110)进行酶法加帽得到高加帽率的Cap 1结构。相比于Cap 0结构,具有Cap 1结构的mRNA对于哺乳动物系统更适合,且使用N1-Me-Pseudo UTP修饰,可提供更高的翻译效率并抑制mRNA介导的先天免疫激活。 利用TransIT-mRNA (MIRUS #MIR2250)转染试剂,将1 μg Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)转染至HEK 293T细胞中,转染20 h后用Bio-Lite  Luciferase Assay System(Vazyme #DD1201)检测转染效率,与竞品相比,转染效率显著提高。 HEK293T细胞转染20 h后,Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)转染效率检测图   Firefly Luciferase mRNA在25˚C储存4天,在4˚C和-20˚C储存14天,对纯度没有显著影响   Firefly Luciferase mRNA反复冻融30次,对纯度没有显著影响 产品 Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo) DD4511 mRNA长度 1921个核苷酸 浓度 1mg/mL 储存buffer RNase-free H2O -85 ~ -65℃保存,干冰运输
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产品编号
DD4511-01/02/03
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Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)

Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)进入细胞后会表达萤火虫荧光素酶蛋白,该酶ATP依赖性地催化D-荧光素氧化,在560nm波长处产生荧光。Firefly Luciferase最初从萤火虫Photinus pyralis中提取,通常用作基因调控和功能研究的生物发光报告基因,适用于mRNA递送、翻译效率、细胞活力和体内成像等实验。

 

本mRNA使用T7 RNA聚合酶,以含有T7启动子序列的线性双链DNA为模板,NTPs为底物,所有UTP均替换为N1-Me-Pseudo UTP,对启动子下游DNA序列进行转录,获得单链RNA(T7 High Yield RNA Transcription Kit(N1-Me-Pseudo UTP) Vazyme #DD4202)。通过Vaccinia Capping System(Vazyme #DD4109)和mRNA Cap 2'-O-Methyltransferase (Vazyme #DD4110)进行酶法加帽得到高加帽率的Cap 1结构。相比于Cap 0结构,具有Cap 1结构的mRNA对于哺乳动物系统更适合,且使用N1-Me-Pseudo UTP修饰,可提供更高的翻译效率并抑制mRNA介导的先天免疫激活。

利用TransIT-mRNA (MIRUS #MIR2250)转染试剂,将1 μg Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)转染至HEK 293T细胞中,转染20 h后用Bio-Lite  Luciferase Assay System(Vazyme #DD1201)检测转染效率,与竞品相比,转染效率显著提高。

HEK293T细胞转染20 h后,Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo UTP)转染效率检测图

 

Firefly Luciferase mRNA在25˚C储存4天,在4˚C和-20˚C储存14天,对纯度没有显著影响

 

Firefly Luciferase mRNA反复冻融30次,对纯度没有显著影响

产品

Firefly Luciferase mRNA(N1-Me-Pseudo)

DD4511

mRNA长度

1921个核苷酸

浓度

1mg/mL

储存buffer

RNase-free H2O

-85 ~ -65℃保存,干冰运输

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