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    RM601说明书-V21.1.pdf

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    2022-05-24 09:58:53
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VAMNE Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit

VAMNE Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit 一举两“得”,将病原微生物核酸一网打尽 兼容:兼容血液、拭子、痰液、肺泡灌洗液、菌液等生物液体样本 快速:单样本提取时长仅需44min 高效:高效裂解难破壁微生物,提高微生物检出 共提取:可同时提取病原微生物的DNA/RNA 本试剂盒适用于从生物液体样本(肺泡灌洗液、血液、痰液、脑脊液、拭子液等)和微生物培养物样本中分离纯化DNA和RNA。试剂盒采用化学法与机械法相结合的裂解方法,能够高效裂解细胞壁较厚的细菌或真菌类样本。本试剂盒中使用的高亲和力硅基磁珠,可在高盐缓冲液作用下,通过氢键和静电吸附核酸,经过漂洗去除多余的蛋白质和盐;在低盐洗脱液或Nuclease-free ddH2O作用下,磁珠释放核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。本试剂盒提取过程安全无毒、操作便捷,无需使用酚氯仿等有毒试剂,在保障核酸提取效率的同时最大限度地去除蛋白质、无机盐及其他杂质。分离的DNA和RNA适用于多种下游应用,包括PCR、Real-Time PCR、宏基因组文库构建、DNA/RNA共建库等。 1. 快速 图1. RM601操作流程概要 2. 兼容 将低起始量的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、毕赤酵母和PRV(DNA病毒)疫苗稀释液、 PRRSV(RNA病毒)疫苗稀释液添加至肺泡灌洗液、口腔拭子、痰液等样本中,参照Vazyme #RM601和Supplier A同类产品提取流程进行提取,使用qPCR法对提取得到的微生物核酸进行定量,检测的平均Ct值越低,表示检出率越高。结果表明:Vazyme #RM601对不同样本和不同微生物的提取效率优于Supplier A(图2)。 图2. 提取产物qPCR定量结果 3. 高检出 在100μl人全血中掺入103的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌等多种病原微生物,参照Vazyme #RM601和Supplier B同类产品提取流程进行提取,提取产物使用Vazyme #ND617进行文库构建,经质控合格的文库使用Illumina HiSeq X10平台进行PE150测序。结果表明:Vazyme #RM601对不同种类病原微生物的提取效率优于Supplier B同类产品(图3)。 图3. 不同病原菌检出Reads数 组分 RM601-01(50 rxns) Lysis Buffer 2 25 ml Binding Buffer 2 10 ml Proteinase K 2 × 1 ml Magnetic Beads 1 ml Wash Buffer A 51 ml Wash Buffer B 24 ml Nuclease-free ddH2O 5 × 1 ml PBS 20 ml Reagent DX 500 μl Lysis Tube 2  50个 2 ml Nuclease-free Tube 50个 1.5 ml Nuclease-free Tube 2 × 50个 Proteinase K,2 ~ 8℃保存,根据不同目的地调整运输方式; 其他组分,15 ~ 25℃保存,室温运输。  
价格:
¥
2500.0
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1000
货号:
RM601-01
所属分类
磁珠法提取
数量:
-
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暂时无货
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组分
说明书

VAMNE Magnetic Pathogen DNA/RNA Kit

一举两“得”,将病原微生物核酸一网打尽

兼容:兼容血液、拭子、痰液、肺泡灌洗液等生物液体样本和菌液样本

快速:单样本提取时长仅需44 min

高效:高效裂解难破壁微生物,提高微生物检出

共提取:可同时提取病原微生物的DNA/RNA

本试剂盒适用于从生物液体样本(肺泡灌洗液、血液、痰液、脑脊液、拭子液等)和微生物培养物样本中分离纯化DNA和RNA。试剂盒采用化学法与机械法相结合的裂解方法,能够高效裂解细胞壁较厚的细菌或真菌类样本。本试剂盒中使用的高亲和力硅基磁珠,可在高盐缓冲液作用下,通过氢键和静电吸附核酸,经过漂洗去除多余的蛋白质和盐;在低盐洗脱液或Nuclease-free ddH2O作用下,磁珠释放核酸,从而达到快速分离纯化核酸的目的。本试剂盒提取过程安全无毒、操作便捷,无需使用酚氯仿等有毒试剂,在保障核酸提取效率的同时最大限度地去除蛋白质、无机盐及其他杂质。分离的DNA和RNA适用于多种下游应用,包括PCR、Real-Time PCR、宏基因组文库构建、DNA/RNA共建库等。

1. 快速

图1. RM601操作流程概要

2. 兼容

将低起始量的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、毕赤酵母和PRV(DNA病毒)疫苗稀释液、 PRRSV(RNA病毒)疫苗稀释液添加至肺泡灌洗液、口腔拭子、痰液等样本中,参照Vazyme #RM601和Supplier A同类产品提取流程进行提取,使用qPCR法对提取得到的微生物核酸进行定量,检测的平均Ct值越低,表示检出率越高。结果表明:Vazyme #RM601对不同样本中不同微生物的提取效率优于Supplier A(图2)。

图2. 提取产物qPCR定量结果

3. 高检出

在100 μl人全血中掺入103的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌、枯草芽孢杆菌等多种病原微生物,参照Vazyme #RM601和Supplier B同类产品提取流程进行提取,提取产物使用Vazyme #ND617进行文库构建,经质控合格的文库使用Illumina HiSeq X10平台进行PE150测序。结果表明:Vazyme #RM601对不同种类病原微生物的提取效率优于Supplier B同类产品(图3)。

图3. 不同病原微生物检出Reads数

组分

RM601-01(50 rxns)

Lysis Buffer 2

25 ml

Binding Buffer 2

10 ml

Proteinase K

2 × 1 ml

Magnetic Beads

1 ml

Wash Buffer A

51 ml

Wash Buffer B

24 ml

Nuclease-free ddH2O

5 × 1 ml

PBS

20 ml

Reagent DX

500 μl

Lysis Tube 2 

50个

2 ml Nuclease-free Tube

50个

1.5 ml Nuclease-free Tube

2 × 50个

Proteinase K,2 ~ 8℃保存,根据不同目的地调整运输方式;

其他组分,15 ~ 25℃保存,室温运输。

关键词:
提取
ml
样本
dna
核酸
rna
微生物
使用
不同
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

常见问题

原因

解决方案

 

痰液样本

加样不准确

 

 

痰液样本粘稠,难以准确加样

 

1. 若样本为白色泡沫状稀痰,取相应体积的痰液,向其中加入5倍体积的N-乙酰半胱氨酸溶液(10 g/L),振荡混匀液化30 - 60 min后进行提取

2. 若样本为白色、黄白色粘痰或黄色伴血丝痰、血痰,取相应体积的痰液,向其中加入10倍体积的N-乙酰半胱氨酸溶液(10 g/L),振荡液化30 - 60 min后进行提取

 

 

病毒样本

检出低

 

取出上清时裂解产物损失

若关注度偏向于病毒检出,可省略Lysis Tube 2裂解步骤,按照如下步骤操作:

1.  向2 ml Nuclease-free Tube中依次加入400 μl样本、40 µl Proteinase K、200 µl Lysis 

Buffer 2、200 µl Binding Buffer 2,涡旋混匀。

2.  选择08-2步骤2相应裂解方法进行操作。

3.  将2 ml Nuclease-free Tube置于56 ℃水浴10 min,瞬时离心,向离心管中加入490 μl异丙醇。

4.  按照08-2步骤5-11继续操作。

核酸产量低

细胞壁破碎不完全

适当增加机械裂解时间,充分破壁

洗脱效率低

将Nuclease-free ddH2O预热至56 ℃后再进行产物洗脱

Wash Buffer A/Wash Buffer B

未添加无水乙醇

1.  请向剩余Wash Buffer A中加入1.35倍体积的无水乙醇

2.  请向剩余Wash Buffer B中加入4倍体积的无水乙醇

核酸纯度低

杂蛋白污染

增加1次Wash Buffer A漂洗步骤

杂质离子污染

增加1次Wash Buffer B漂洗步骤

组分

RM601-01(50 rxns)

Lysis Buffer 2

25 ml

Binding Buffer 2

10 ml

Proteinase K

2 × 1 ml

Magnetic Beads

1 ml

Wash Buffer A

51 ml

Wash Buffer B

24 ml

Nuclease-free ddH2O

5 × 1 ml

PBS

20 ml

Reagent DX

500 μl

Lysis Tube 2 

50个

2 ml Nuclease-free Tube

50个

1.5 ml Nuclease-free Tube

2 × 50个

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