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FastPure EndoFree Plasmid Mini Kit

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    DC203说明书-V22.1.pdf

    大小:
    2022-07-07 13:34:22
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FastPure EndoFree Plasmid Mini Kit

高产无内毒,25 min转染级质粒小提
价格:
¥
500.0
市场价
500.0
浏览量:
1000
货号:
DC203-01
所属分类
柱式提取
数量:
-
+
库存:
998
*具体价格咨询当地业务员
暂时无货
1
产品详情
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说明书
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FastPure EndoFree Plasmid Mini Kit

高产无内毒,25 min转染级质粒小提

质粒DNA提取;产物可用于酶切;PCR;测序;连接转化;转染

·  产量高:提取效率高,质粒DNA产量高达50 µg

·  内毒素残留量:内毒素残留量≤0.1 EU/µg,下游可做转染级别实验

·  快速:无需冷热交替,25 min内即可完成提取

本试剂盒适用于1 - 5 ml过夜培养的菌液,采用优化的碱裂解法裂解细胞,通过独特的硅胶膜吸附技术与特殊的溶液,可特异性结合质粒并有效地去除内毒素、蛋白等杂质,整个提取过程仅需25 min。提取的质粒DNA内毒素残留低(≤0.1 EU/μg),可用于多种细胞的转染及常规的分子实验。

1. 产量高 

图1 质粒质量的检测结果

分别使用Vazyme #DC203(简称V) 与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取pUC57(高拷贝)和M3K(低拷贝)的质粒,对提取产物进行浓度测定 (图1A、B) 及跑胶检测 (图1C、D)。结果表明,Vazyme #DC203 提取的质粒产量高、完整性好。

 

2. 内毒素含量低

图2 质粒内毒素残留量的检测结果

分别使用Vazyme #DC203(简称V)与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取pUC57(高拷贝)和M3K(低拷贝)的质粒,对提取的产物进行内毒素残留量的测定(图 2A、B)。结果表明,Vazyme #DC203提取的质粒内毒素残留量低,且优于竞品。

 

3. 快速

图3 DC203操作流程概要

Vazyme #DC203无需冷热交替和内清剂,操作简便快速,全程仅需25 min。

15 ~ 25℃保存 

关键词:
DC203
质粒DNA提取
无内毒素质粒小提
质粒分离
质粒抽提
质粒提取
无内毒素质粒提取
去内毒素质粒提取
质粒DNA
去内毒素质粒小提
质粒纯化
质粒DNA纯化
去内毒素质粒小量纯化
无内毒素质粒小量纯化
DNA提取
DC203-00
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

1. 测试的样本类型,投入量以及对应产量?

高拷贝质粒1 - 5 ml产量约10 - 50 μg,低拷贝数的质粒5 - 10 ml产量约2 - 5 μg

 

2. 质粒DNA 产量低?

1)细菌未充分裂解:确保菌体在Buffer P1中充分重悬,成团的细菌因裂解不充分会降低产量。

2)菌液保存不当:菌种保存过程中存在质粒丢失现象,建议培养细菌前最好先划线或涂布平板活化,以稳定产量。

3)低拷贝质粒或大质粒(>10 kb):不同质粒载体因拷贝数差异会造成产量有明显的波动。对于低拷贝质粒或大质粒(>10 kb)应加大菌液使用量,使用5 - 10 ml过夜培养的菌液,同时按照比例增加Buffer P1、Buffer P2和Buffer P5的用量,洗脱液应65℃预热,以增加提取效率,其他步骤按说明书。

4)Buffer P2析出:Buffer P2低温时易析出,37℃加热至完全溶解,混匀后

5)菌液培养时间过长:细菌的培养时间不要超过16 h,最好控制在12 - 14 h。

6)宿主菌株差异:不同宿主对质粒产量也会产生影响,建议使用end A-大肠杆菌菌株,如DH5α、TOP10及XL10等。  

 

3. 若产物发现RNA残留?

1)储存温度不当或超出有效期:已加入RNase A的Buffer P1长时间室温放置可能会出现酶活下降,使用后应及时放回2 ~ 8℃。

2)菌液体积过高:由于菌体数量过多,导致Buffer P1中RNase A不足以消化菌体中的RNA,建议减少菌液体积进行实验。

 

4. 提取的DNA纯度低(即OD260/OD230偏低)?

1)可能是加Buffer P1后未充分重悬菌体,裂解不完全导致产量和纯度偏低;

2)盐离子残留:建议沿吸附柱管壁四周加入Buffer PW2,或加入Buffer PW2后盖盖颠倒混匀2 - 3次,有助于完全冲洗管壁上的盐分;

 

5. 提取的质粒能否转染293细胞?

可以。

 

6. DC203提取质粒片段长度的范围?

可兼容至21.5Kb大小的质粒。

这是描述信息
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