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FastPure EndoFree Plasmid Mini Kit

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  • cp

    DC203说明书-V22.1.pdf

    大小:
    2022-07-07 13:34:22
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FastPure EndoFree Plasmid Mini Kit

FastPure® EndoFree Plasmid Mini Kit 产量高:提取效率高,质粒DNA产量高达50 µg 内毒素残留量:内毒素残留量≤0.1 EU/µg,下游可做转染级别实验 快速:无需冷热交替,25 min内即可完成提取 本试剂盒适用于提取1-5 ml过夜培养的菌液,采用优化的碱裂解法裂解细胞,通过独特的硅胶膜吸附技术与特殊的Buffer ERB和Buffer ERW溶液,可特异性结合质粒并有效地去除内毒素、蛋白等杂质,整个提取过程仅需25 min。提取的质粒DNA内毒素残留低(≤0.1 EU/μg),可适用于多种细胞的转染及各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接等实验。 1. 产量高  图1 质粒质量的检测结果 分别使用Vazyme #DC203(简称V) 与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取pUC57(高拷贝)和M3K(低拷贝)的质粒,对提取产物进行浓度测定 (图1A、B) 及跑胶检测 (图1C、D)。结果表明,Vazyme #DC203 提取的质粒产量高、完整性好。   2. 内毒素含量低 图2 质粒内毒素残留量的检测结果 分别使用Vazyme #DC203(简称V)与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取pUC57(高拷贝)和M3K(低拷贝)的质粒,对提取的产物进行内毒素残留量的测定(图 2A、B)。结果表明,Vazyme #DC203提取的质粒内毒素残留量低,且优于竞品。   3. 快速 图3 DC203操作流程概要 Vazyme #DC203无需冷热交替和内清剂,操作简便快速,全程仅需25 min。 组分 DC203-01(50 rxns) RNase A Solution 375 μl Buffer QB 5 ml Buffer P1 15 ml Buffer P2 15 ml Buffer P5 8 ml Buffer ERB 35 ml Buffer ERW 30 ml Buffer PW1 30 ml Buffer PW2 10 ml Endotoxin-free Elution Buffer 10 ml FastPure DNA Mini Columns II 50 个 Collection Tubes 2 m 50 个 15 ~ 25℃保存 
价格:
¥
500.0
市场价
500.0
浏览量:
1000
货号:
DC203-01
所属分类
柱式提取
数量:
-
+
库存:
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*具体价格咨询当地业务员
暂时无货
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组分
说明书

FastPure® EndoFree Plasmid Mini Kit

产量高:提取效率高,质粒DNA产量高达50 µg

内毒素残留量:内毒素残留量≤0.1 EU/µg,下游可做转染级别实验

快速:无需冷热交替,25 min内即可完成提取

本试剂盒适用于提取1-5 ml过夜培养的菌液,采用优化的碱裂解法裂解细胞,通过独特的硅胶膜吸附技术与特殊的Buffer ERB和Buffer ERW溶液,可特异性结合质粒并有效地去除内毒素、蛋白等杂质,整个提取过程仅需25 min。提取的质粒DNA内毒素残留低(≤0.1 EU/μg),可适用于多种细胞的转染及各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、连接等实验。

1. 产量高 

图1 质粒质量的检测结果

分别使用Vazyme #DC203(简称V) 与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取pUC57(高拷贝)和M3K(低拷贝)的质粒,对提取产物进行浓度测定 (图1A、B) 及跑胶检测 (图1C、D)。结果表明,Vazyme #DC203 提取的质粒产量高、完整性好。

 

2. 内毒素含量低

图2 质粒内毒素残留量的检测结果

分别使用Vazyme #DC203(简称V)与市售竞品 (A、B、C、D、E、F、G、H、I),按照各自流程提取pUC57(高拷贝)和M3K(低拷贝)的质粒,对提取的产物进行内毒素残留量的测定(图 2A、B)。结果表明,Vazyme #DC203提取的质粒内毒素残留量低,且优于竞品。

 

3. 快速

图3 DC203操作流程概要

Vazyme #DC203无需冷热交替和内清剂,操作简便快速,全程仅需25 min。

组分

DC203-01(50 rxns)

RNase A Solution

375 μl

Buffer QB

5 ml

Buffer P1

15 ml

Buffer P2

15 ml

Buffer P5

8 ml

Buffer ERB

35 ml

Buffer ERW

30 ml

Buffer PW1

30 ml

Buffer PW2

10 ml

Endotoxin-free Elution Buffer

10 ml

FastPure DNA Mini Columns II

50 个

Collection Tubes 2 m

50 个

15 ~ 25℃保存 

关键词:
mini
提取
buffer
ml
质粒
内毒素
dc203
vazyme
残留量
产量
未找到相应参数组,请于后台属性模板中添加

1. 测试的样本类型,投入量以及对应产量?

高拷贝质粒1 - 5 ml产量约10 - 50 μg,低拷贝数的质粒5 - 10 ml产量约2 - 5 μg

 

2. 质粒DNA 产量低?

1)细菌未充分裂解:确保菌体在Buffer P1中充分重悬,成团的细菌因裂解不充分会降低产量。

2)菌液保存不当:菌种保存过程中存在质粒丢失现象,建议培养细菌前最好先划线或涂布平板活化,以稳定产量。

3)低拷贝质粒或大质粒(>10 kb):不同质粒载体因拷贝数差异会造成产量有明显的波动。对于低拷贝质粒或大质粒(>10 kb)应加大菌液使用量,使用5 - 10 ml过夜培养的菌液,同时按照比例增加Buffer P1、Buffer P2和Buffer P5的用量,洗脱液应65℃预热,以增加提取效率,其他步骤按说明书。

4)Buffer P2析出:Buffer P2低温时易析出,37℃加热至完全溶解,混匀后

5)菌液培养时间过长:细菌的培养时间不要超过16 h,最好控制在12 - 14 h。

6)宿主菌株差异:不同宿主对质粒产量也会产生影响,建议使用end A-大肠杆菌菌株,如DH5α、TOP10及XL10等。  

 

3. 若产物发现RNA残留?

1)储存温度不当或超出有效期:已加入RNase A的Buffer P1长时间室温放置可能会出现酶活下降,使用后应及时放回2 ~ 8℃。

2)菌液体积过高:由于菌体数量过多,导致Buffer P1中RNase A不足以消化菌体中的RNA,建议减少菌液体积进行实验。

 

4. 提取的DNA纯度低(即OD260/OD230偏低)?

1)可能是加Buffer P1后未充分重悬菌体,裂解不完全导致产量和纯度偏低;

2)盐离子残留:建议沿吸附柱管壁四周加入Buffer PW2,或加入Buffer PW2后盖盖颠倒混匀2 - 3次,有助于完全冲洗管壁上的盐分;

 

5. 提取的质粒能否转染293细胞?

可以。

 

6. DC203提取质粒片段长度的范围?

可兼容至21.5Kb大小的质粒。

  

组分

DC203-01(50 rxns)

RNase A Solution

375 μl

Buffer QB

5 ml

Buffer P1

15 ml

Buffer P2

15 ml

Buffer P5

8 ml

Buffer ERB

35 ml

Buffer ERW

30 ml

Buffer PW1

30 ml

Buffer PW2

10 ml

Endotoxin-free Elution Buffer

10 ml

FastPure DNA Mini Columns II

50 个

Collection Tubes 2 m

50 个

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