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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA加尾法逆转录试剂盒
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miRNA 1st Strand cDNA Synthesis Kit (by tailing A)

miRNA加尾法逆转录试剂盒

逆转录;miRNA加尾法合成第一链cDNA

·  优异的逆转录性能:Vazyme #MR201具有更优异的逆转录性能
·  较高的逆转录特异性:专为miRNA加尾法逆转录定向改造的逆转录酶,较大限度降低miRNA前体的逆转录
·  简便快捷的操作:加尾和逆转一步完成

本产品是适用于microRNA (miRNA)加尾法合成cDNA的专用试剂盒,只需一步操作,即可完成加尾反应和逆转录反应。本产品以miRNA或总RNA为模板,在Poly A polymerase (PAP)的作用下,在其3'末端加Poly (A),随后使用通用逆转录引物进行逆转录反应。本产品包含专为miRNA逆转录定向改造的逆转录酶和PAP,配以优化的缓冲体系,在具有高灵敏度的同时,较大限度降低miRNA前体的逆转录,保证后续结果稳定可靠。

1. 简便快捷的操作

一步操作完成加尾反应和逆转录反应

2. 优异的逆转录性能

以HeLa miRNA为模板(100 ng/μl),使用 Vazyme #MR201 以及品牌相关产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应,将得到的cDNA分别在六种引物体系(T1/2/5/12/15/20)中进行qPCR定量分析。从图中可以看出,除两个体系中存在部分ΔCT<-0.5,其余均ΔCT>0.5或-0.5<ΔCT<0.5,说明Vazyme #MR201的逆转录效率优于同类产品。

注:ΔCT = CT(竞品)– CT(Vazyme)

 

3. 较高的逆转录特异性

以HeLa miRNA为模板(100 ng/μl),分别使用专为miRNA逆转录定向改造的逆转录酶(Vazyme #MR201)和未定向改造的逆转录酶(其余组分与Vazyme #MR201一致)进行逆转录反应,在相同条件下对逆转录反应得到的cDNA进行qPCR检测2个体系。可以看到,使用Vazyme #MR201逆转录miRNA后qPCR检测得到的溶解曲线单峰且峰形优异,特异性更高。

-30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

关键词:
MR201
miRNA cDNA第一链合成
加尾法miRNA cDNA第一链合成
加尾法miRNA 逆转录试剂
miRNA逆转录
miRNA第一链cDNA合成
miRNA加尾法合成第一链cDNA
miRNA反转录
miRNA cDNA合成
RT-PCR
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1. MR201这款试剂盒是否含有RNA酶抑制剂

答:是。

 

2. 是否有专门提取miRNA的试剂盒

答:RC201。

 

3. 后续搭配的定量试剂是什么

答:Q712是目前测试中表现最好的定量试剂。

 

4. 内参如何做逆转

答:内参可以和miRNA一起逆转。

 

5. 投入total RNA,所有的RNA都会被加尾吗?

答:是的,均会进行无差别加尾。

 

6. MR201试剂盒是否既可逆转miRNA,又可以进行常规逆转录?

答:MR201是专门针对miRNA逆转录开发的试剂盒,不建议进行常规逆转录(逆转引物有差别,且该逆转录酶是经过定向改造,对较长的RNA逆转效率低)。

 

7. 模板投入total RNA还是miRNA更适合

答:针对此款试剂盒,投入miRNA更好。投入total RNA可能会影响特异性。

 

8. 如果客户模板是total RNA,那么投入量范围是多少?

答:total RNA和miRNA投入量范围一致。

 

9. tsRNA如何进行逆转录反应?

答:tsRNA是一类由tRNA衍生的非编码小RNA,通常长度为18 ~ 40 nt,在维持mRNA稳定性、调节翻译等过程中发挥重要作用。由于tsRNA长度过短,对其进行qPCR定量时,无法直接对tsRNA进行正、反向引物的设计(通常正向引物就足以覆盖tsRNA全长),因此可以使用增加逆转录产物长度的miRNA逆转录试剂盒来解决这一问题,miRNA的逆转录方法有两种,分别是茎环法和加尾法。Vazyme为您提供高特异性的茎环法逆转录产品MR101,及高通量的加尾法逆转录产品MR201均可对tsRNA进行逆转。

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