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RD102说明书-V22.2.pdf
大小：2022-09-19 14:00:28
ResiDNA Precise Quantitative CHO DNA Detection Kit
ResiDNA Precise Quantitative CHO DNA Detection Kit
可准确定量生物制品中残留的CHO DNA试剂盒
CHO宿主细胞残留DNA定量检测
· 灵敏度高：检出限低至0.3 fg/μl
· 专属性强：对CHO高特异性，外源基因不影响检测
· 耐用性高：DNA的碎片化程度不会对检测结果造成影响
· 高平台：高平台值
ResiDNA Precise Quantitative CHO DNA Detection Kit是一款利用探针法定量检测CHO宿主细胞残留DNA的试剂盒，可用于检测各种生物制品及药品的中间品、半成品和成品中CHO宿主细胞残留DNA，包含CHO DNA定量参考品，浓度与国家标准品一致，具有特异性强、灵敏度高(可检测fg级)、检测快速、稳定性好及操作便捷等特点。本试剂盒可搭配ResiDNA Hunter Residual DNA Sample Preparation Kit (Vazyme #RD101)使用，用于CHO宿主细胞残留DNA的准确检测。
1. 参考品与CHO国家标准品对齐
每批次试剂盒中的CHO DNA参考品均与国家CHO DNA标准品标定，RD102试剂盒DNA参考品与国家标准品制备标曲基本无偏差，检测值偏差CV<5%。
红色：国家标准品，蓝色：试剂盒参考品
图1 参考品与国家CHO DNA标准品标定扩增曲线
2. 灵敏度高：检出限低至0.3 fg/μl
检测3 fg/μl，1 fg/μl，0.3 fg/μl，0.1 fg/μl的CHO DNA，浓度为0.3 fg/μl及以上浓度复孔的CV值<10%，即CHO DNA残留检测试剂盒的定量限可达0.3 fg/μl。
表1 定量限结果分析
|
|
3 fg/μl |
1 fg/μl |
0.3 fg/μl |
|
Mean |
29.50 |
31.30 |
32.84 |
|
SD |
0.06 |
0.10 |
0.51 |
|
CV |
0.19% |
0.31% |
1.56% |
3. 专属性强：对CHO高特异性，外源基因不影响检测
在含有高达100 ng/μl大鼠（Rat）、人源（Human）、大肠杆菌（E.coli ）基因组干扰的情况下，CHO检测性能仍不受影响。
图2 RD102特异性检测结果分析图
注：背景干扰模板浓度均为100 ng/μl；CHO DNA的浓度梯度均为3 fg/μl-300 pg/μl
4. 耐用性高：DNA 的碎片化程度不会对检测结果造成影响
将CHO DNA标准品，1份作为对照，剩下4份分别进行1、5、10、30 min不同时长的超声处理，获得一系列不同程度碎片化的DNA，将超声的DNA和对照分别稀释成100 fg/μl、10 fg/μl、1 fg/μl、0.1 fg/μl作为模板进行测试，qPCR结果显示DNA碎片化程度不会影响检测结果。
图3 DNA超声破碎结果分析图
左图为：超声获得不同程度碎片化的DNA胶图；右图为：超声获得的DNA qPCR CT值比对
5. 高平台：高平台值
优异的扩增线型，与主流品牌相比较高平台值，低浓度样本仍能有高平台。
红色：Vazyme #R102；蓝色：Supplier A；绿色：Supplier B
图4 不同品牌试剂盒参考品的扩增曲线图
注：CHO参考品的梯度范围均为3 fg/μl-300 pg/μl
-30 ~ -15℃保存，≤0℃运输。
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