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    R711说明书V23.1.pdf

    大小:
    2023-03-29 17:41:42
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FreeZol Reagent

室温RNA提取试剂升级,高兼容高产量,低毒更安心
价格:
¥
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货号:
R711-01/02
所属分类
沉淀法提取
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-
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库存:
19998
*具体价格咨询当地业务员
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说明书
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FreeZol Reagent

室温RNA提取试剂升级,高兼容高产量,低毒更安心

RNA提取,产物可用于RT-PCR、qRT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译和高通量测序等分子生物学实验

1)安全低毒:无需使用氯仿等有毒试剂

2)操作简便:全程室温操作,无需使用冷冻离心机

3)高质量RNA:从各类细胞和动物组织中提取的RNA产量、纯度高

FreeZol Reagent 广泛适用于从培养细胞、动物组织、简单植物组织等样本中提取 Total RNA。与传统 Trizol 法相比,本产品使用方法简单,全程常温操作,且无需使用氯仿进行分层。此外,本产品将蛋白质、DNA、多糖等杂质沉淀至管底,RNA 分布在上层溶液中,可有效去除杂质,保证了提取的 RNA 完整性和纯度。在 1 h 内即可完成全部的提取过程,获得的 Total RNA 可以直接用于 RT-PCR、qRT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译和高通量测序等各种分子生物学实验。

1)操作简便

图1  R711与常规Trizol操作流程对比图

2)RNA产量高、完整性好

分别使用 Vazyme #R711与其他同类产品(A、B—常规 Trizol,Vazyme #R701)提取大鼠肾脏、脾脏、HepG2和SP2/0细胞,并对RNA产物进行浓度测定和琼脂糖凝胶电泳检测(图2)。结果表明,Vazyme #R711提取的RNA产量和完整性均较好。

图2 对不同动物组织和细胞提取RNA性能展示

3)广泛的细胞和动物组织兼容性

使用 Vazyme #R711对不同动物组织(包括水产和昆虫)、培养细胞进行RNA提取,并对产物进行琼脂糖凝胶电泳检测(图3)。结果显示,Vazyme #R711对各类样本具有广泛的兼容性。

注:R表示大鼠。(例如,R-脑为大鼠脑组织)

图3 不同样本RNA提取产物电泳图

2 ~ 8℃保存,根据不同目的地调整运输方式。

关键词:
R71102
R711-00
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Q1:R711相比R701升级了什么?区别是?

A:1、兼容性更广,相比R701能兼容更多的动物组织和细胞(包括肾脏、肺脏、胰腺等样本);2、产量更高,相比于R701主要体现在动物组织和细胞;3、纯度更好,相比于R701,OD260/230的比值整体都更高;4、操作更加便利,相比于R701加水后有明显分层,加入异丙醇离心后沉淀更明显。

Q2:加入异丙醇离心后看不见沉淀?

A:通常情况下,经过异丙醇沉淀可以看见白色胶状沉淀。若遇到沉淀不可见的情况,可能是RNA含量低或者组织投入量过低,建议加大投入量;且在08-2步骤5进行弃上清操作时,请采用吸取而不是倾倒的方法,以免沉淀丢失;取上层溶液,加5-10 μg RNase-free糖原作为载体与RNA共沉淀。此外,部分组织材料由于含有较多的代谢产物,导致沉淀不能聚集而分散在离心管壁上,此时,请沿液面缓慢吸取上清,经过75%的乙醇清洗RNA沉淀之后,白色团块状沉淀会聚集和明显。

Q3:如何保存组织样本?

A:如果不能立刻提取RNA,应将组织离体后迅速投入液氮冷冻,并用液氮保存;或液氮速冻后,转移至-85 ~ -65℃保存。不能直接将新鲜组织放在-85 ~ -65℃冷冻,因为样品的冻结是一个缓慢的过程,在这个过程中内源RNase会将RNA降解。此外,针对不具备液氮速冻条件的情况,可将新鲜组织充分浸泡在RNA Keeper Tissue Stabilizer (Vazyme #R501)中,在室温可存放一周,2 ~8℃存放一个月,或在-30 ~ -15℃/-85 ~ -65℃长期保存。  

Q4:出现污染?

A:1、基因组污染:建议减少样本起始投入量;增加FreeZol Reagent体积;吸取上清溶液时注意不要吸到下层有机相;部分植物样本在使用辅助剂时会出现基因组残留;在样本裂解时,加适量HAc(每500 μl FreeZol Rengent加5 μl)。2、蛋白质污染:提取产物OD260/OD280 偏低时,提示可能存在蛋白质污染。遇到此种情况,需要考虑是否组织投入量过大,导致裂解不充分,可以适当增加FreeZol Reagent或者降低组织投入量进行提取。3、多糖污染:适当延长RNA晾干时间。4、脂肪污染:选择说明书08-1(可选)步骤3之后,转移澄清中间层进行下一步操作。5、盐残留:吸取上清溶液时注意不要吸到下层有机相,增加75%乙醇漂洗次数。

Q5:R711加入稀释液之后是否有分层?

A:有,加入稀释液振荡离心后,可以明显看到明显分层,杂质沉淀在管底,上层溶液澄清透明。

Q6:R711提取出来的Total RNA包括miRNA吗?

A:包括。

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