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HiScript IV RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

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HiScript IV RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

“Pro” 追求更高逆转录效率
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HiScript IV RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)

“Pro” 追求更高逆转录效率

第一链cDNA合成;逆转录;基因表达分析;两步法qRT-PCR检测

优异的逆转录效率:与其他反转录试剂相比 R423 可得到更小的 CT 

广泛的模板兼容性:对于低浓度、低表达或降解的 RNA 样本,仍能高效合成 cDNA

HiScript IV RT SuperMix for qPCR(+gDNA wiper)为 HiScript III 三代产品的升级产品,包含升级四代逆转录酶 HiScript IV Reverse Transcriptase 及针对逆转录特殊优化的Buffer,进一步提高逆转录反应中 cDNA 合成效率,即便对于低浓度、低表达或降解的 RNA 样本,仍能高效合成 cDNA 。本产品包含基因组清除模块, 2 分钟即可高效去除 gDNA 污染,因此无需跨内含子设计 qPCR 引物。逆转录产物兼容染料法与探针法 qPCR 。

优异的逆转录效率

以 100 ng 动物样本、植物样本、细菌样本的 RNA 为模板,使用 Vazyme #R423 以及市售其他逆转录产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应。将得到的 cDNA 进行多个基因的 qPCR 定量分析。结果显示,Vazyme #R423 与 Supplier C 的逆转录效率相当,优于Supplier A、B 相关逆转录产品。

注:△CT = CT(市售各品牌逆转录产品) – CT(Vazyme #R423)

 

优异的模板兼容性

以100 ng人源FFPE样本、降解293细胞样本(Rin = 1)的RNA为模板,使用Vazyme #R423以及市售其他逆转录产品,按照各自说明书推荐程序进行逆转录反应。将得到的cDNA进行多个基因的qPCR定量分析。结果显示,Vazyme #R423的逆转录效率优于Supplier A、Supplier B和Supplier C。

注:△CT = CT(市售各品牌逆转录产品) – CT(Vazyme #R423)

 

以7个10倍梯度稀释后的293细胞RNA为模板,使用Vazyme #R423分别对其进行逆转录,然后进行基因A的qPCR检测。结果显示,Vazyme #R423在宽广的RNA投入模板浓度区间内具有良好的线性关系。

- 30 ~ -15℃保存,≤0℃运输。

关键词:
R42301
R423
逆转录
R423-00
2023论文回顾
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Q1:基因组清除不干净怎么解决?

A:若 No RT control 指示基因组未清除完全,建议通过 NTC 实验排查是否存在气溶胶污染。若排除气溶胶污染后仍存在清除不完全的情况,可将去基因组反应时间延长至 15 min 。

 

Q2:R423 兼容的 RNA 投入量范围?

A:R423 可兼容 5 ug 的 RNA 投入量,但过高的 RNA 产生的过多 cDNA 可能超出 qPCR 的定量范围,此时需要正确稀释 cDNA 以达到下游 qPCR 试剂的兼容范围。一般来说,RNA 投入量为 1~5 μg 时,可将 cDNA 稀释 10 倍使用。  

 

Q3:R423 后续能接 PCR 扩增吗? 

A:R423 是 qPCR 专用预混液,不推荐使用 R423 的 cDNA 产物作为长片段扩增模板,一般来说,R423 逆转录产物不超过 550 bp。若客户想进行 PCR 扩增,建议使用通用型试剂 R312。

 

Q4:R423 是否需要混匀操作?

A:R423 里面含有甘油成分,需要对逆转录试剂进行混匀操作。

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